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人教版生物选修一课题3《酵母细胞的固定化》ppt课件2.ppt
* 课题3 酵母细胞的固定化 温故知新: 1、洗衣粉中添加________可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________ 四类。 2、影响酶活性的因素有_______、 ________和_________。 酶制剂 蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶 温度 酸碱度 表面活性剂 1、酶制剂的优点: 2、酶制剂存在的缺陷: 如何解决这个问题? 固定化酶技术和固定化细胞技术 1、生产高果糖浆的方法是什么? 2、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点? 3、了解高果糖浆生产过程。 4、这种方法的优点是什么? (一)固定化酶的应用实例 一、基础知识: 固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体上)。 1、生产高果糖浆的方法是? 生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶;其作用是将葡萄糖转化为果糖;这种酶稳定性好,可持续发挥作用。 2、生产高果糖浆需要什么酶?其作用是什么?这种酶有何特点? 3、固定化酶技术生产高果糖浆的过程: 注意反应柱的各部分名称。 你能说出这种方法的优点吗? 固定化酶技术的优点: (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离; (2)固定在载体上的酶可以被反复利用。 4、这种方法的优点是什么? 在生产实际中使用固定化酶技术的不足: 一种酶只能催化某一种或某一类的化学反应,而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行,所以操作比较麻烦。 怎么办? 可采用固定化细胞技术。 (二)、固定化细胞技术 1、概念: 利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间内的技术。 细胞中含有一系列酶,在细胞正常生命活动的过程中,通过代谢产生所需要的代谢产物。 2.将酶或细胞固定化的方法 将酶(或细胞)包埋在细微网格里 将酶(或细胞)相互连接起来 将酶(或细胞)吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 物理吸附法 酶和细胞固定方法的选择 ①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定 ②细胞适合采用包埋法固定 (1)、方法 (2)、原因 ①细胞个大,酶分子很小 ②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出 3、固定化细胞常用的载体 常用的不溶于水的多孔性载体有哪些? 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等 海藻酸钠 聚丙烯酰胺 从操作角度来考虑,你认为哪种方法更容易? 哪一种方法对酶活性的影响更小? 固定化细胞技术 固定化细胞技术 固定化酶技术和固定化细胞技术这两种方法 固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶? 如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应,应该选择哪种方法? 一系列酶 固定化细胞技术 如果反应底物是大分子物质,能否用固定化细胞技术? 为什么? 那应该采用何种技术? 不能 大分子物质难以通过细胞膜 固定化酶技术 1.酶的固定方法不包括( )。 A.将酶吸附在固体表面上 B.将酶相互连接起来 C.将酶包埋在细微网格里 D.将酶制成固体酶制剂,如加酶洗衣粉中的酶 D 2、固定化细胞的优点是( )。 A.能催化大分子物质的水解 B.可催化一系列化学反应 C.与反应物易接近 D.有利于酶在细胞外发挥作用 B 活化是指让处于休眠状态的微生物重新恢复正常生活状态的过程。 〖思考2〗活化是指什么? 1. 制备固定化酵母细胞 二. 实验设计 (2)配制CaCl2溶液: (3)配制海藻酸钠溶液: 〖思考3〗微火加热并不断搅拌的目的是什么? 防止海藻酸钠焦糊。 (4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合: 〖思考4〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞? 防止高温杀死酵母细胞。 (5)固定化酵母细胞: 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法: 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。 这一阶段成功与否呢?怎样评价? 观察凝胶珠的颜色和形状: 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。 (二).固定化酵母细胞的发酵 (6)冲洗:将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2~3次。 (7)发酵:150mL10%葡萄糖+固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→密封→25℃发酵24h。 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封? 〖
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