p38MAPK和ERK信号通路激活在CD151促进内皮细胞迁移中的作用机制.pdfVIP

第 44卷第 3期第 258页 华中科技大学学报 (医学版) VOI_44 No．3 P．258 2015年 6月 ActaM edUniv SciTechnolHuazhong Jun． 2015 p38MAPK及 ERK信号通路激活在 CD151 促进 内皮细胞迁移 中的作用机制* 刘望宇 ， 曾和松 ， 李鹏程 ， 费宇杰 ， 左后娟。△ 华 中科技大学同济医学院附属同济医院 消化 内科 心血管 内科 ，武汉 430030 摘要 ：目的 研究 p38MAPK信号通路及 ERK信号通路激活在 CD151促进人脐静脉 内皮细胞 (HuVEcs)迁移 中 的机制。方法 包装携带 CD151、antiCD151和 GFP的重组腺相关病毒 ，转染 HUVECs。Westernblot检测 HUVECs 中CD151、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38丝裂原活化蛋 白激酶 (MAPK)蛋 白的表达；利用改 良的Boyden趋化小室进 行细胞迁移检测 ；在细胞转染 同时分别给予 ERK抑制剂 (PD98059，20~mol／I)，或 p38MAPK抑制剂 (SB203580，2O “mol／L)，然后检测细胞迁移。结果 ① CD151组较空 白对照组及 GFP组明显促进细胞迁移 的能力 ，而 antiCD151组 则显著抑制细胞 的迁移 ，差异具有统计学意义 (PO．05)。② CD151高表达促进 ERK信号通路激活 ，而对 p38MAPK 信号通路无显著作用 。③ ERK抑制剂 (PD98059)显著抑制 CD151转染后 的促 HuVEcs迁移 的作用 (P0．05)，而 p38MAPK抑制剂(SB203580)无 明显作用 。结论 CD151具有促进细胞迁移 的作用 ，CD15l通过激活 ERK信号通路促 进细胞迁移 ，而 p38MAPK信号通路 的激活则在 CD151促进 HuVECs迁移中无显著作用。 关键词 ：cDl51； 人脐静脉 内皮细胞 ； 细胞外信号调节激酶 ； 丝裂原活化蛋 白激酶 ； 细胞迁移 中图分类号 ：R329．28 DOh10．3870／i．issn．1672-0741．2015。03、003 Roleofp38MAPK andERK SignalPathwaysintheCD151一promotedHUVECsM igration LiuZhaoyu ，Zeng Hesong ，LiPengcheng etal DepartmentofGnstroe￡8ro￡og ，。DepartmentofCardiology，TongjiHospital，TongjiMedicalCollege HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China Abstract Objective Tostudythemechanism bywhichtheactivationofp38MAPK andERK signalpathwaysaffects CD151-promotedmigrationofhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)．M ethods rAAV—CD151，rAAV—antiCD151 andrAAV—GFPwereconstructedandtransfectedintoHUVECs．ProteinexpressionlevelsofCD151。p38MAPK andERK were measuredbvW esternblot．TbemigrationofHUVECswasdetectedbyusingmodifiedBoydenchamberassay．HUVECswere treatedwithERK inhibitor(PD98059，2Ottmol／L)orp38MAPK inhibitor(SB203580，2O “mol／L)atthetimeoftransfectionand cel1migrationwasdetermined．Results ① Cel1migrationwassi