poems综合患者高水平血清血管内皮生长因子的细胞来源及产生机制.pdfVIP

目录 中文摘要…………………………………………………………………………………．1 英文摘要…………………………………………………………………………………．3 第一部分POEMS综合征患者高水平血清血管内皮生长因子的细胞来源及产生机 常0．．．．．．．．．…．．．．．…．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．…．．…．．．．……．．．．．．．．．．…．．．．．．．．．…．5 弓l言．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．……5 材料与方法………………………………………………………………………………．7 结果…………………………………………………………………………………．15 讨{仑………………………………………………………………………………………32 结论………………………………………………………………………………………36 第二部分文献综述……………………………………………………………………．42 PoEMS综合征的发病机制……………………………………………………………．42 附录：中英文缩略词表…………………………………………………………………．56 致谢………………………………………………………………………………………57 独创性声明………………………………………………………………………………58 万方数据 摘要 背景和目的 POEMS综合征是一种少见的单克隆浆细胞增殖性疾病，主要临床特点包括多 发周围神经病、硬化性骨病和水负荷异常等。血管内皮牛长因子(VEGF)，作为一 种调控血管新生和增强血管通透性的重要细胞凼子，是该病诊断、病情监测和疗效 评价的核心分子标志物。但是，目前关于POEMS综合征患者高水平血清VEGF的 具体细胞来源，及其产生调控机制还缺乏系统的研究。 材料与方法 收集2014年2月至2015年4月就诊于北京协和医院的62例初治及46例其间 完成治疗的POEMS综合征患者临床资料、血清和骨髓标本。采用ELISA法测定血 清VEGF水平。通过实时荧光定量PCR和流式细胞学，分别在mRNA和蛋白水平 测定骨髓内浆细胞表达VEGF的相对水平，并和血清VEGF水平进行相关性分析。 利用流式细胞学，对骨髓内浆细胞亚群进行分析，并测定不同亚群细胞表达VEGF 和白介素．6(IL一6)的水平。应用免疫组织化学法，检测患者骨髓活检组织中浆细 胞分布、克隆性和VEGF及相关调控分子，包括IL．6和缺氧诱导因子1-ct(HIF．1Ⅱ) 的表达情况。采用SPSS 22软件进行统计分析，当P0．05时认为存在统计学差异。 结果 初治POEMS综合征患者血清VEGF水平(中位值5958 pg／mL)，显著高于其 他疾病和健康对照(p0．001)，具有明确的诊断价值(受试者工作曲线下面积O．988， P0．001)，当选取2000pg／mL作为临界值时，其诊断的特异性和敏感性分别为 97．7％和91．9％。随治疗进行，血清VEGF水平逐渐下降(6程治疗后，中位值1184 pg／mL，PO．001；12程治疗后，中位值832 者骨髓内浆细胞VEGF在mRNA和蛋白水平上均高于对照，且随治疗逐步下降。 重要的是，骨髓内浆细胞VEGF水平和血清VEGF水平有显著相关性(初治，rho= 中，5l例经骨髓流式细胞学未检测到单克隆浆细胞，仅存在多克隆浆细胞。另11 例患者(18％)，骨髓中同时检测到单克隆和多克隆浆细胞，数量上以后者较多(4l％ VS．59％)。单克隆浆细胞VEGF水平与多克隆浆细胞类似(平均荧光强度2009VS． 2367，P=0．594)，但IL．6水平显著高于后者(平均荧光强度1635VS．865，P=O．006)。 在46例骨髓活检组织中，POEMS综