内皮型一氧化氮酶基因多态性与神经管畸形关系的初步研究.pdf

摘 要 目的：了解石河子地区神经管畸形（Neural Tube Defects ，NTDs ）的发病情况，探讨 eNOS 基因 G894T 位点和 4a/bVNTR 位点基因多态性与 NTDs 的相关性，明确导致 NTDs 发生的相关危险因素，为预防和控制NTDs 的发生提供理论依据。 方法：监测2001 年1 月-2008 年12 月在石河子地区出生的围产儿中NTDs 的发病情况； 收集2008 年1 月-2009 年7 月在本院及其周边医院生育NTDs 患儿或B 超诊断为NTDs 儿引产的30 名母亲为病例组，选择同期生育正常健康儿的母亲60 例为对照组。设计统 一的调查表对每个对象进行面对面询问NTDs 可疑危险因素情况，同时对每个调查对象 抽取静脉血3ml ，对其提取DNA ，用PCR-RFLP （聚合酶链反应-限制性内切酶片段长 度多态性）方法确定eNOS 基因G894T 位点及4a/bVNTR 位点多态性型别； 结果： ⑴ 石河子地区8 年共监测围产儿24417 例，其中NTDs 儿40 例，围产儿中NTDs 的平 均发生率为16.38/万，团场地区NTDs 的发生率为26.26/万，远高于市区6.54/万。 ⑵ 可疑危险因素的单因素、多因素分析：经单因素非条件logistic 回归分析有显著意义 的变量8 项引入多因素非条件logistic 回归分析，用后退法逐步回归，最终进入模型的 变量有3 项，分别为孕期服药（OR=13.664）、孕期接触农药化肥（OR=4.341 ）和eNOS 基因G894T 位点的突变（OR=4.651）。 ⑶ eNOS 基因G894T 位点与NTDs 的关系分析：eNOS 基因G894T 位点在本次研究中 有三种基因型，即野生型GG、杂合突变型GT 和纯和突变型TT 。其基因型频率（GG、 GT、TT ）在病例组中的构成分别为46.67% 、40% 、13.33%，在对照组中的构成分别为 73.33%、21.67% 、5%，两组间的差异有统计学意义，χ2=6.413 ， p0.05 ；其等位基因 G 的频率在病例组和对照组中的构成分别为66.7%和84.2%，T 等位基因的频率分别为 33.3%和15.8%，差异有统计学意义，χ2=7.218，p0.01 ； ⑷ eNOS 基因 4a/bVNTR 位点的基因频率在病例组和对照组中的比较：eNOS 基因 4a/bVNTR 位点在本次研究中有两种基因型，即b/b 和a/b 型。其基因型频率（bb 、ab ） 在病例组中的构成分别为63.33%和36.67%，在对照组中的分布频率分别为80%和20% ， 在两组中的差异无统计学意义，p0.05 ；b 等位基因在病例组和对照组中的分布频率分 别为81.7%和90%，a 等位基因在病例组和对照组中的分布频率分别为18.3%和10%， 差异无统计学意义，p0.05 ； ⑸ 协同作用：对单因素导致NTD s 有意义的危险因素作交互作用分析，结果孕期农药 化肥的接触和基因突变有协同作用。农药化肥接触对NTDs 的影响（OR=2.22），单纯 基因G894T 位点突变对NTDs 的影响（OR=2.114），但两者共同作用时对NTDs 的影 响为（OR=25.9）； 结论： ⑴ eNOS 基因894 位点G→T 突变是本研究中导致NTDs 发生的一个独立的危险因子， TT 基因型在母亲中的分布是导致NTDs 发生的主要原因； ⑵ eNOS 基因4a/bVNTR 位点突变可能不足以构成NTDs 发生的独立危险因子； ⑶ eNOS 基因 894 位点 G→T 突变与母亲孕期接触农药化肥对神经管畸形的发生具有 协同作用，两者同时阳性时可使神经管畸形发生的风险性明显增高。 关键词：神经管畸形，内皮型一氧化氮合酶，基因多态性，流行病学特征，交互作用 论文类型：A （基础研究） II Abstract Objective: To understand the birth prevalence and the epidemiological status of Neura