大鼠耳蜗发育中yn、vamp-2的表达和atp来源的研究.pdf

大鼠耳蜗发育过程中SYN 、VAMP-2 的表达差异 摘 要 目的：突触囊泡的包装、储存和神经递质释放与突触素 （synaptophysin ，SYN ）和小泡相关膜蛋白-2 （vesicle-associated membrane protein-2/synaptobrevin,VAMP-2 ）有着重要关系。二者在耳蜗 发育过程中起着重要作用。本次实验拟通过研究不同鼠龄大鼠耳蜗内 SYN、VAMP-2 的差异表达，来探讨二者表达与听觉功能发育成熟的关 系。 方法：选取出生后 1 天(P1)、5 天(P5)、10 天(P10)、14 天(P14)及 28 天(P28)健康 Sprague－Dawley 大鼠各5 只，行耳蜗冰冻切片，运用 免疫荧光的方法，观察各组间SYN、VAMP-2 表达分布的差异。 结果：大鼠出生后，其耳蜗形态发育尚不成熟，P1 和 P5 组大鼠 耳蜗Kolliker 器还未退化，耳蜗的 Corti 器、Kolliker 器均未发现 SYN 表达。P10 组耳蜗Corti 器结构基本成形，其顶周也未发现SYN 表达， 但在耳蜗底周和蜗管中部 SYN 的分布呈现特异性定位，内螺旋束和外 螺旋束出现了较弱的点状表达。P14 组耳蜗Corti 器结构形态接近成熟， 底周至顶周蜗管的内螺旋束和外螺旋束均出现簇状表达，较 P10 组强 烈，且在 Deiters 细胞内侧缘出现点状表达，从内向外表达逐渐减弱。 V P28 组中，SYN 在内螺旋束呈星点状表达，在外螺旋束呈杯盏状表达， 在五组中表达最为强烈。隧道螺旋束与内螺旋束相连处、内侧的Deiters 细胞内侧缘也可见SYN 的较弱表达。大鼠螺旋神经元（spiral ganglion neuron ，SGN）在发育成熟过程中数目有所减少，各组神经元胞浆内均 有SYN 广泛均匀表达，且随鼠龄增长在胞浆中的表达逐渐增强。 VAMP-2 在P1 、P5 组和P10 组顶周大鼠耳蜗Corti 器、Kolliker 器 中均未发现特异性表达。在P10 组底周和蜗管中部、P14 与P28 组大鼠 耳蜗中Corti 器的表达部位与SYN 基本一致。在P14 和P28 组内毛细胞 顶部的胞浆可见星点状表达。各组SGN 胞浆中均有VAMP-2 广泛均匀 表达。 结论：SYN 和VAMP-2 与耳蜗神经纤维的定位分布和神经生物活 动(突触囊泡搭靠、释放等)存在紧密联系。二者在大鼠耳蜗发育过程中 的表达存在差异，它们在不同鼠龄的表达变化与既往研究显示的耳蜗神 经纤维发育过程基本一致。这种差异有利于神经末梢和靶细胞间构型建 立，以及在听觉系统发育中对听觉信息编码的正确形成起着关键作用。 关键词：SYN，VAMP-2 ，耳蜗发育，突触 VI STUDY OF DIFFERENTIAL EXPRESSION OF SYN, VAMP-2 IN THE RAT COCHLEA DURING DEVELOPMENT AND THE SOURCE OF ATP IN THE RAT COCHLEA ABSTRACT Objective: Synaptophysin (SYN) and vesicle-associated membrane protein- 2/synaptobrevin (VAMP-2) are associated closely with packaging or storage of synaptic vesicles and neurotransmitter release. Both of them play an important role in the cochlea during development. Our study examined the differential expression of SYN and VAMP-2 in t