白细胞介素-1、白细胞介素-23在炎症性肠病患者肠粘膜的表达.pdf

·中文论著摘要· 白细胞介素一17、白细胞介素-23在炎症性肠病患者肠 粘膜的表达 目的 的病因及发病机制尚未阐明，治疗缺乏特异性，没有治愈的方法，目前免疫异常 被公认为在IBD的发病过程中具有极为重要的作用，而白细胞介素(IL)是其中最 主要的具有多种生物活性的一组淋巴因子，本研究通过对IBD患者肠黏膜中 的关系。 材料和方法 一、一般资料 选择中国医科大学盛京医院2003年10月至2007年4月保存有完整资料的诊 断明确的CD及同期UC住院患者活动期病变部位肠黏膜活检或手术标本，活动期 的临床表现、常规影像学、内镜学及组织学标准。 二、主要试剂 1、兔抗人IL．17、IL．23单克隆抗体 2、二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒 3、免疫组化过氧化物酶标志的链霉卵白素(SP)试剂盒显色试剂盒 三、实验方法 免疫组化检测：免疫组化染色采用链霉素抗生物素蛋白一过氧化酶连接(S-P) 法。标本均经10％福尔马林固定，常规石蜡包埋。全部蜡块均行4Pm厚连续切片， 常规脱蜡至水，室温下3％过氧化氢去除内源性过氧化物酶，微波修复抗原；滴加 兔196，)，于室温下孵育30分钟；DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片。 四、结果判定 为细胞质染色：组织切片中显示细胞质染为淡黄色至黄棕色者为阳性细胞标志， 将阳性细胞按其数量及显色强度分为3级：表达弱阳性(+)，即阳性细胞数10％， 显色强度为淡黄色或仅个别细胞呈黄至棕黄色染色；表达强阳性(+++)，即阳性 细胞数60％，多数细胞呈黄至棕黄色染色；表达中度阳性(++)，即阳性细胞数 及显色强度介于弱阳性与强阳性之间。凡显色强度与背景无明显差别者为阴性。 细胞百分数。上述结果均由两人双盲法独立判断，取其平均值。 五、统计学处理 差异有统计学意义。 结 果 质着色；黏膜固有层和淋巴小结内也可见散在阳性细胞。比较活动期UC、CD患者 二者分别与正常对照组比较，均见显著性差异，其中UC组与J下常对照组比较， IL-17、IL一23阳性染色强度均高于对照组，二者差异有统计学意义(1I值分别为 色强度亦均高于对照组，二者差异有统计学意义(u值分别为3．251、3．316，P 值均0．01)。比较活动期UC、CD患者肠黏膜固有层内阳性细胞百分数，发现Uc 患者IL-17阳性细胞百分数高于CD患者，而IL-23阳性细胞百分数低于CD患者， 2 正常对照组比较，均见显著性差异，其中UC组与正常对照组比较，IL-17、IL一23 肠黏膜固有层内阳性细胞百分数均高于对照组，二者差异有统计学意义(t值分 肠黏膜固有层内阳性细胞百分数亦均高于对照组，二者差异有统计学意义(t值 分别为2．891、8．298，P值均O．01)。 讨论 IBD在西方国家相当常见，近年我国报道的病例明显增多。目前普遍认为IBD 的发病机制与遗传易感宿主对肠道菌丛的免疫应答失常有关，其中免疫调节异常 和细胞信号转导通路是IBD研究最活跃的领域。 Thl7细胞是新近发现的一群效应性CD4+T辅助细胞亚群，其具高致病性， IL一17是一种促炎症细胞因子，是Thl7细胞的主要效应因子，它具有强大的募集和 激活嗜中性粒细胞能力。此外，IL—17还可与炎症因子TNF2fl等有协同作用，放大 加强其致炎效应。本研究发现，活动期的IBD患者，UC和CD组结肠粘膜组织中IL-17 高表达，而在正常对照组结肠粘膜组织中IL-17很少表达，提示在IBD患者结肠局 是自身免疫性疾病的真正病因。本研究发现，活动期的IBD患者，UC和CD组结肠粘 膜组织中IL一23高表达，而在正常对照组结肠粘膜组织中IL-23很少表达，提示 IL一23参与了IBD患者结肠粘膜炎症反应。 总之，本研究显示，活动期IBD患者肠粘膜IL-23、IL-17的表达较正常对照均 诱导并驱动Thl7细胞产生IL—17、IL一6和TNF2 a，引起结肠炎症。目前研究证明， IL一23／IL一17轴在IBD的发病机制中可能处于关键地位，并有望成为IBD新的治 疗靶标。