β淀粉样蛋白142对原代培养大鼠小胶质细胞中tnfa表达影响的初步研究.pdf

B淀粉样蛋白卜42对原代培养大鼠小胶质细胞中TNF0【 表达影响的初步研究 摘要 【目的】 通过原代培养的方法培养大鼠小胶质细胞，掌握其培养、分离及鉴定的方法， 从而为进一步研究其功能奠定基础。初步阐明Apl．42对体外小胶质细胞中 炎治疗提供一定的理论依据。 【方法】 取S．D新生大鼠的大脑皮层进行混合胶质细胞的原代培养，用摇床振摇法 分离小胶质细胞，并进行Mac．1免疫细胞化学鉴定。取分离纯化后培养10天左 右的细胞，以l×105／孔的浓度接种至六孔板中，稳定24小时后，用含1％的血清 为0．3umol／L、3umol／L的培养基分别刺激细胞6小时、24小时、48小时。用 荧光定量PCR的方法检测各组细胞中TNFamRNA表达量，并收集细胞培养液 进行ELISA检测，并进行统计学分析。 【结果】 1．原代培养过程动态观察：取材后l～2d，由于大量神经元死亡，细胞较稀 疏：随后星形胶质细胞开始增殖，至5～6d，长满培养瓶，而同时小胶质细胞也 明显增多，呈亮点状分布于星形胶质细胞的上层；9～12d，小胶质细胞的数量达 到高峰。振摇分离2～3天后，细胞呈圆点状；分离后约8～10d后小胶质细胞胞