猪繁殖与呼吸综征病毒nsp2抗原表位的鉴定及其在病毒增殖中的调控分析.pdf

摘要 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒 Porcine and reproductivemspireatory virus,PRRSV 引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状为主要特征的接触性传染 syndrome 病．本研究 1 应用杂交瘤细胞技术成功地制备出针对PRRSV BJ-4非结构蛋白Nspl、Nsp2和 BJ．4 Nsp3的单克隆抗体； 2 利用Nsp2单抗及PRRSV阳性血清分析了PRRSVNsp2高变区的 B细胞线性表位； 3 分析了PRRSV 单克隆抗分析了PRRSV BJ．4在感染细胞过程中Nsp2对病毒复制增殖的调控作用．研究结果为 深入分析猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2的生物学功能奠定了重要的理论基础。 在利用分子生物学软件GOLDKEY对PRRSV 原相关信息分析的基础上，设计针对Nspl、Nsp2和Nsp3抗原表位富集区域的特异性引物，采用 和46．9％。Western blotting分析结果显示，重组蛋白可被猪源PRRSV阳性血清所识别。 blotting鉴定表明，9株单克隆抗体均能够特异，单一地识别各自所针对的重组蛋白；亚型鉴定结 果显示9株单抗均属IgG2a亚类，轻链均为x型；对单抗识别表位的分析表明，针对Nsp2的6 株单抗和Nsp3的2株单抗各自所识别的抗原位点不同。 BJ-4感 利用纯化的rNsp2作为包