全二维制备液相色谱系统构建和应用.pdf

摘要 摘要 针对现有接口无法满足制备的要求和固定相选择的局限，本文首先设计了一 维柱后稀释．富集柱富集的切换接口，在电控二位十通阀的控制下，利用两个富 集柱交替对中压液相洗脱液进行富集，进而分段送入制备型高效液相，构建了能 够制备复杂天然产物的反相×反相分离模式的二维制备液相色谱系统，首次实 现连续的中压色谱与制备液相色谱二维联用：基于本系统的第一维为中压色谱 柱，为填料的选择提供了更大的自由空间，将分离模式拓展到葡聚糖凝胶×反 相和聚酰胺×反相两种分离模式。 本文首先用河套大黄水提取物作为复杂化合物模型来考察富集柱的富集能 力，具体考察了柱的选择、保留能力、稀释倍数、柱压和洗脱能力，通过流出曲 线和回收率直观的评价了富集柱的富集能力，确定了市售的15咖×30mmi．d．预 柱为最理想的富集柱、稀释2倍为最优条件；然后用河套大黄检验在中压液相× 制备型高效液相上的全二维液相色谱系统的分离能力，考察了不同的流动相组成 和上样量对反相×反相模式分离效果的影响；基于反相×反相模式的研究， 将葡聚糖凝胶×反相和聚酰胺×反相应用于河套大黄水提物的分离制备；结 果，从河套大黄中分离得到15个己知化合物。与传统的方法比较，三种二维模式 表现出良好的分离效率和样品处理能力。 最后将反相×反相模式应用于脂溶性样品蟾酥，两维用不同的流动相，改 善正交性，充分展现了该系统的优势。从蟾酥中分离得到一个生物碱新化合物和 9个强心甾类化合物，鉴定出新化合物为(1)2-(5一羟色胺羰酰基)．4【2-(羧基氨基) 乙基】_6．氧哌啶-4．羧酸。对液相色谱峰进行了匹配，从液相谱图可以看出本系统 明显改善了蟾酥直接进样分离效果差的缺点。 关键词：全二维制备液相稀释式富集柱接口 电控二位十通阀 Abs仃act Abstract Duet0the interface can notmeetthe existing switchingtechnoIogy requirements of andlimi协tionsofchoice introducesthe preparation of僦iona巧ph嬲e，thispaper ofainte幽cewitll Valve、water design ten-port dilution觚deIlrichment switching Eluent五的mmedium column； pressureliquid accumulated columnsunder altematelybyt、Ⅳo仃apping thecon仃olofelec仃onic con仃ol觚o then仃ansferredintOthe ValVe，锄d ten-way prep删iVehi曲pe哟nnance medium liquidchromatography(PHPLC)．A Voltageliquid×preparation勺『，pehi曲 w弛I冲×RPmodewaS perfo姗柚celiquidcllromatographySystem constructed， whichw嬲suitableforthe of natural