流式细胞术下观地塞米松和环孢素对嗜碱粒细胞活化的影响.pdfVIP

中文摘要 流式细胞术下观察地塞米松和环孢素对嗜碱粒细胞活化的影响 中文摘要 背景 变态反应性疾病在人群中十分常见，治疗仍然棘手。嗜碱粒细胞作为I型变 态反应的效应细胞，正逐渐引起人们重视，可能成为治疗变态反应性疾病的重要 靶点。现有的方法通过检测细胞介质和细胞因子释放量来观察嗜碱粒细胞活化， 操作较困难而且敏感性和特异性也不理想。流式细胞术的发展使体外检测嗜碱粒 细胞的活化成为可能，有着方便、快捷、敏感性和特异性均较好的特点。 目的 在体外建立IgE介导的嗜碱粒细胞活化模型，通过加入不同药物浓度的地塞 米松、环孢素和氯苯那敏，观察嗜碱粒细胞表面活化标记表达的变化，探讨药物 对体外嗜碱粒细胞活化的作用。 方法 抽取健康志愿者静脉血，分为不同浓度的地塞米松、环孢素和氯苯那敏处理 组，加入不同浓度的药物在37℃预孵育1小时，阴性和阳性对照组均加入等量 的PBS并孵育l小时。随后阳性对照组和药物处理组分别加入抗IgE抗体以活 FITC／CDl23PⅣ 化嗜碱粒细胞，阴性对照组加入等量PBS。各组细胞采用CD63 HLA-DR PerCP染色标记，通过流式细胞术检N；I-周血嗜碱粒细胞表面CD63的 表达。 结果 1． 阴性对照组嗜碱粒细胞表面CD63阳性百分比为O．70±0．86％，阳性对照组 嗜碱粒细胞表面CD63阳性百分比为50．58+9．04％，两者差异有显著性 (PO．01)。 2．不同浓度的地塞米松处理组中，嗜碱粒细胞表面CD63阳性表达受到明显抑 制，差异有显著性(氏O．01)。药物浓度越高，CD63阳性细胞越少。 3．不同浓度的环孢素处理组中，嗜碱粒细胞表面CD63阳性表达均大幅降低， 差异有显著性(尸o．01)。不同浓度的环孢素处理组之问，CD63表达没有 显著性差异(尸l0．05)。 4．浓度为lO之M氯苯那敏处理组CD63阳性的细胞百分比降低，与阳性对照相 阳性细胞和阳性对照组之间无显著性差异(胗O．05)。 结论 利用流式细胞术建立体外嗜碱粒细胞活化模型是可行的，可以进一步应用于 中文摘要 药物筛选和并推测临床疗效。 地塞米松和环孢素可以明显抑制体外嗜碱粒细胞 的活化。 氯苯那敏对体外嗜碱粒细胞活化的抑制作用较弱。 【关键词】：嗜碱粒细胞活化，流式细胞术，CD63，CDl23，HLA—DR，地塞米松， 环孢素，氯苯那敏 【中图分类号】：R75 3 英文摘要 Effectofdexamethasoneand onhuman cyclosporinbasophils：a flow—assisted／nvitro assay． Abstract Background remainsa disordersare whichthetreatment Allergic common,of challenge． cellsof a of vitro effector Basophils，as allergy,becomepromisingtargetdrugs．／n mediatorand／or releasetestshavebeenusedinthe of cytokine study