暴发性肝衰竭大脑中枢氨转运体基因表达的改变.pdfVIP

|／㈣Y1 目录 7689㈣73 中文论著摘要……………………………………………………………………1 英文论著摘要……………………………………………………………………4 二、英文缩略语………………………………………………………………………7 前言………………………………………………………………………………8 刖看………………………………………………………………………………o 实验材料与方法…………………………………………………………………9 实验结果…………………………………………………………………………．12 讨论………………………………………………………………………………．16 结论………………………………………………………………………………18 四、本研究创新性自我评价…………………………………………………………19 五、参考文献…………………………………………………………………………20 综述………………………………………………………………………………22 致谢………………………………………………………………………………32 个人简历…………………………………………………………………………33 ·中文论著摘要· 暴发性肝衰竭大鼠脑中枢氨转运体基因表达的改变 目 的 暴发性肝衰竭(FHF)是一种以凝血酶原时间延长和肝性脑病为主要特征的 临床疾病，肝性脑病作为其好发且致死性强的一种并发症，越来越得到人们的关 注。目前研究表明，氨在致脑水肿致肝性脑病起了重要作用。因此研究氨进入脑 中枢的机制以及在肝衰竭中其机制有否改变对将来可能阻滞氨的进入脑中枢有十 分重要的意义。 氨转运体一类近来发现的一类专性转运氨的蛋白，在原核细胞、真菌类和哺 乳动物都有表达，为一类AMT／MEP／RH蛋白。其在大鼠中表达为RhAG、RhD、 RhBG和RhCG蛋白，在体内各器官起转运氨作用的为后两种蛋白。目前研究表 明氨转运体蛋白在肾脏远端肾小管上皮细胞、集合管上皮细胞、睾丸精索上皮细 胞、肝细胞、十二指肠上皮细胞和脑中枢都有表达。然而其机制和分布并不十分 明朗。本研究的目的为制作一个有效的暴发性肝衰竭的模型，并研究氨转运体蛋 白，包括RhBG蛋白和RhCG蛋白二者的基因在肝衰竭大鼠脑中枢基因表达的改 变。 材料与方法 1、动物模型制备 D—GaLN 实验动物为28只雄性Wistar大鼠，随机分为4组。l组：800mg／Kg LPS联 D—GaLN和100吲Kg 和1009／KgLPS联用ip组，10只；2组：400mg／Kg LPS联用ip组，5只；4组： 用ip组，5只；3组：800mg／KgD—GaLN和1001ag／Kg LPS联用iV组，8只。 400mg／KgD—GaLN和16¨g／Kg 2、血清√6衄水平的测定 应用生物化学方法检测血清ALT水平，以明确暴发性肝衰竭时肝脏功能生化 学改变。 3、大鼠生存曲线的建立 记录各组大鼠24小时死亡率和死亡时间，比较各组大鼠的生存曲线。 4、建立时间点爆发性肝衰竭动物模型 实验动物为40只雄性Wistar大鼠，随机分为6组，其中Oh5只，2h5只， 6h 5只，9h5只，12h10只，24h10只。 5、实时定量PCR检测 mRNA 应用Trizol试剂提取脑组织RNA，利用实时定量PCR对RhBG