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中文摘要 TRAIL的耐药机制及其上调MM细胞表面粘附分子 CXCR4表达和分子机制的初步探讨 摘 要 目的：多发性骨髓瘤(Mutiple 浆细胞异常增生性的恶性肿瘤。虽然近年来MM的治疗取得 了长足进展，但是MM仍然是一种不能治愈的肿瘤。因此有 必要探索更加有效的治疗药物。 NecrosisFactor- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor related apoptosisinducing (Tumor Necrosis Factor，TNF)超家族成员。已有实验证实， TRAIL能迅速诱导肿瘤细胞凋亡，而对大多数正常组织细胞 没有毒性。因此，TRAIL用于肿瘤治疗的可能性激起许多研 究者的兴趣。此前我们也已经证实在一定浓度范围内，TRAIL 对人多发性骨髓瘤细胞株RPMl8226的生长起抑制作用，并 且这种抑制呈时间剂量依赖性。趋化因子受体CXCR4(cxc Chemokine 体为基质细胞衍生因子SDF．1。它广泛表达于造血和非造血 肿瘤细胞中，不仅参与维持正常造血细胞的存活和增殖，同 时与恶性造血细胞的增殖以及在血液、骨髓、淋巴结的浸润 密切相关。我们用流式细胞术也证实了TRAIL可以上调人骨 髓瘤细胞株RPMl8226表面粘附分子CXCR4的表达。 本研究是在前期研究的基础上进行的，以人多发性骨髓 中文摘要 异。从而进一步探讨TRAIL对人多发性骨髓瘤的作用机制， 为本药的临床应用奠定理论基础。 方法：1．细胞培养和传代 la 为5％的二氧化碳的培养箱中培养，每5～6天传代1次，实验 用对数生长期的细胞。 分子CXCR4表达的影响 CXCR4表达的影响 ul， 后，收集细胞，用冷PBS洗两遍后，各取细胞悬液100 u 6ul， l，对照组加入CD4 分别加入CDl84(CXCR4单抗)6 轻轻混匀，室温避光反应30分钟，立即在流式细胞仪 细胞百分数表示。 2．2半定量逆转录一聚合酶链反应方法检测不同浓度TRAIL CXCR4 mRNA表达 作用于RPMl8226细胞12h、24h和48h 的变化 中文摘要 RPMl8226细胞12h、24h和48hCXCR4 mRNA表达的变化 2．4Western 胞24h CXCR4蛋白表达的变化 分子CXCR4表达的影响与NF．r,B的相关性 3．1半定量逆转录一聚合酶链反应方法检测不同浓度TRAIL NF．r,B 作用于RPMl8226细胞12h、24h和48hmRNA表达的 变化 。 NF．r,B RPMl8226细胞12h、24h和48hmRNA表达的变化 3．3Westem 细胞24hNF．KB蛋白表达的变化 同敏感性及TRAIL受体表达差异的比较 4．1倒置相差显微镜下观察不同浓度的TRAIL作用不同时间， RPMl8226与U266细胞的形态学变化 4．2半定量逆转录一聚合酶链反应方法检测不同细胞株 U266细胞中TRAIL受体