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Rho／Rho激酶信号通路在实验性变态反应性脑脊髓炎 发生机制中的作用研究 研究生：皇甫蓓蓓 专业：老年医学(神经病学) 导师：曹秉振教授 中文摘要 目的：采用豚鼠全脊髓均浆免疫Wistar大鼠，建立实验性变态反应性脑 激酶、胶质细胞的动态表达，并探讨其意义。 方法：利用豚鼠全脊髓均浆，给予雌性Wistar大鼠足垫注射并加完全福 氏佐剂(CFA)，建立EAE大鼠模型，并对大鼠进行体重、神经功能评分测 定，采用组织病理染色与免疫组织化学染色法，动态观察EAE大鼠在发病 后1天、3天、7天、14天、1月的脑及脊髓组织的病理演变及Rho激酶与 胶质细胞的表达。探讨Rho／Rho激酶信号系统与胶质细胞反应在EAE大鼠 发病机制中的意义。 结果：l、动物行为学改变 模型组大鼠在免疫后8．12天左右相继发病， 主要表现为尾部肌张力降低、消失，双后肢无力、瘫痪，动物以双上肢向前 爬行时剑突以下的部分着地，双后肢拖拉在地面，足背面贴地，可伴有大小 便失禁，严重者出现四肢瘫痪、抬头无力甚至死亡，体重比对照组显著降低 症状达高峰期，发病后7天左右动物开始逐渐恢复。 2、组织病理改变 光镜下： 脑、脊髓实质及蛛网膜下腔小静脉周围炎性细 胞浸润，呈“袖套”状改变；大脑半球及脊髓实质的小静脉周围出现髓鞘崩解 或脱失；神经轴索相对完好；小胶质细胞及星形胶质细胞反应明显，并贯串 于EAE的全部过程。电镜下：脑、脊髓组织中毛细血管内皮细胞线粒体肿 胀，嵴缺失或出现髓样小体，多见管腔狭窄闭锁；神经元及胶质细胞胞质中 线粒体和内质网肿胀、嵴缺失或空化；有髓神经纤维鞘膜扭曲、层面分离或 断裂，轴索内微丝微管稀疏，线粒体肿胀。 3、免疫组化染色 发病后1天，Rho激酶即有表达，3天后达到高峰，持续 1 2．3天后表达有所下降，1月后仍有少量表达；小胶质细胞及星形胶质细胞反 应贯穿于EAE全过程，发病l天小胶质细胞表达即达高峰，并持续到高峰 期，7天后表达减少，14天明显减少；发病1．3天，星形胶质细胞有少量表 达，7天达到高峰，14天表达较高峰期减少。EAE组各相应时间点CNS阳 性细胞数均显著高于对照组(P0．01)。 结论：1、采用豚鼠全脊髓均浆免疫Wistar大鼠，可成功建立实验性 变态反应性脑脊锈炎(EAE)模型。 2、该EAE模型早期的病理改变为血管周围炎性细胞浸润，呈“袖套”状改变 及小胶质细胞反应，而后期则主要为自质脱髓鞘及星形胶质细胞反应。 3、EAE大鼠Rho激酶表达增加，胶质细胞反应明显，两者在中枢神经系统 炎性脱髓鞘病中起到重要作用。 关键词：实验性变态反应性脑脊髓炎；Rho激酶；胶质细胞；大鼠。 2 SIGNALING KINASE ONRHO／RHO THESTUDY OF THE‘MECHANISM IN PATHWAY ENCEPHALOMYELITIS ALLERGIC Beibei Postgraduate：Huangfu rology) Specialty：Geratology(Neu Cao Tutor：Prof．