上皮性钙粘素预葡萄胎恶变的价值及其基因启动子区甲基化的研究.pdf

上皮性钙粘素预测葡萄胎恶变的价值及其基因启动子区甲基化的研究 中文摘要 目的研究上皮性钙粘素(E一钙粘素)及其基因启动子区CpG岛甲基化在葡萄胎恶 变中的作用，探讨去甲基化制剂5’一氮杂一2’脱氧胞苷(5-Aza—CdR)诱导人绒癌 细胞株JAR中E一钙粘素基因恢复表达的可能性。 方法选取葡萄胎组织37例，来自青岛大学医学院附属医院妇产科2002年一2008 年收治的葡萄胎患者首次清宫后的葡萄胎样组织蜡块。其中17例葡萄胎发生恶变， 20例葡萄胎未发生恶变，以上标本均经病理医师证实，并有完整的临床病理资料。 选取正常早孕妊娠绒毛组织10例，来自2011年3月一4月于本院门诊因早孕要求终 止妊娠而行人工流产术的患者，作为正常对照。采用免疫组化法(SP法)检测所有 正常早孕绒毛和葡萄胎组织E一钙粘素的表达。37例葡萄胎组织、10例正常早孕绒 毛组织及人绒癌细胞株均经酚一氯仿法提取DNA，随后采用甲基化特异性PCR(MSP) 去甲基化药物5’一氮杂一2’脱氧胞苷处理后E一钙粘素mRNA的表达。所有数据采用 SPSS 等级相关分析法检验，显著性检验水准Q=O．05，POi05表示差异有统计学意义。 结果1．正常早孕绒毛组织中E一钙粘素蛋白膜表达的阳性率为100％。 2．非恶变葡萄胎、恶变葡萄胎组织中E一钙粘素蛋白表达的阳性率分别为 PO．05)。E一钙粘素在正常早孕绒毛和非恶变葡萄胎组织中的表达量差异无显著性 (卢O．540)，在恶变葡萄胎组织的表达量明显低于正常早孕绒毛和非恶变葡萄胎组 织(PO．01)。 3．在恶变葡萄胎、非恶变葡萄胎、正常早孕绒毛组织中其甲基化率分别为 恶变葡萄胎组织的甲基化率明显高于正常早孕绒毛组，差异有统计学意义(PO．05 )；恶变葡萄胎组织与非恶变葡萄胎组织之间比较差异无统计学意义(P=O．136)。 E一钙粘素蛋白表达在甲基化组低于非甲基化组，两者呈负相关(tau-b=O．769，尸 0．05)。 4．在恶变葡萄胎组织中，随解剖学分期的增加E一钙粘素基因甲基化率增高， (tau-b=-O．371，PO．05)。 5．E一钙粘素基因在人绒毛膜癌细胞株JAR中启动子区呈甲基化状态，未处理的 5-Aza—CdR umol／l 人绒毛膜癌细胞株JAR中检测到E一钙粘素基因mRNA弱表达，经10 预组E一钙粘素基因mRNA表达条带强度与相应的B-actinmRNA表达条带强度的比 值作比较，可看出5-Aza-CdR处理后E一钙粘素基因mRNA表达上调了94．7％。 结论 与正常早孕绒毛组织相比，非恶变葡萄胎、恶变葡萄胎组织中E．钙粘素蛋白 表达下调，E．钙粘素蛋白表达水平与E．钙粘素基因启动子甲基化相关，提示E一钙粘 素基因启动子过度甲基化可能是E一钙粘素失活的机制之一，与葡萄胎的恶化进展有 基因的转录活性。 [关键词]葡萄胎；妊娠滋养细胞肿瘤；上皮性钙粘素；甲基化；5’一 氮杂一2’一脱氧胞苷 in THEPROGNOSTICVALUEOFE．CADHEIUN GENEPROMOTER MoLEANDTHESTUDYoFE．CADHERIN ON HYPERMETHYLATI Abstract To theroleofE-eadherin andthe Objectiveinvestigate expressionpromotermethylation of ofE—cadherininthe transformation mole．To