兔蒸发过强型干il-6、tnf-α、icam-1的表达及其治疗的实验研究.pdfVIP

中文摘要 L．6、TNF．Ⅱ、I 兔蒸发过强型干眼I CAM·1的表达 及其治疗的实验研究 摘 要 目的：干眼是指由于泪液的量或质的异常引起的泪膜不 稳定和眼表面损害，从而导致眼不适症状的一类疾病，其临 床表现主要是眼疲劳，异物感，干涩感，烧灼感，畏光流泪 眼红等症状。随着社会经济的发展和人们生活水平的提高， 干眼的发病率有明显增高趋势。 美国国立眼科研究所干眼研究组将干眼分为泪液生成 不足型和蒸发过强型两种。前者临床上以干燥性角结膜炎 能障碍(MGD)、暴露及角膜接触镜等因素所致的干眼症。 近年来免疫学和分子生物学的研究进展使我们对干眼 的病因有了更新的认识，细胞因子作为一类由免疫细胞产生 的高活性蛋白质多肽分子，参与了免疫反应和炎症反应，在 干眼的发病机制中起到了十分重要的作用。研究发现，眼表 面的免疫反应和炎症是影响干眼病情的一个非常重要的因 素，SS和KCS患者的结膜、泪腺活检标本内和泪液中均发 现炎症细胞浸润及炎症反应标记物表达，尤其是发现白介素 等含量和表达增加，并和干眼的损害程度成正相关。然而蒸 发过强型干眼发病机制是否也有细胞因子参与还未得到证 实。 Y．亚麻酸是一种必需脂肪酸，具有广泛的生理活性和明 中文摘要 显的药理作用。国外有实验表明其对KCS有一定疗效，但 具体作用机制不详。 动物模型是进行临床和基础研究的载体。本实验采取对 蒸发过强型干眼模型兔和正常兔眼角膜、结膜和泪液中炎症 在角膜结膜组织当中的表达，观察这三种因子在蒸发过强型 干眼中表达和变化，从而明确炎性因子在蒸发过强型干眼发 病机制中的作用。同时治疗组干眼兔给予口服Y一亚麻酸，观 察治疗前后三种因子在上述组织中的变化及组织的病理改 变，探讨p亚麻酸在治疗蒸发过强型干眼时的效果和机制， 从而为临床使用及推广此药提供理论依据。 方法 1选用健康新西兰大白兔30只，雌雄不分，体重2．2．5蚝， 将实验动物随机分为3组，第1组10只兔，为正常组；第2 组10只兔，为对照组；第3组10只兔，为药物治疗组。 2干眼模型制作：对照组和治疗组兔采取手术显微镜下烧灼 器逐个烧灼睑板腺开口的方法封闭睑板腺口，术后每天观察 time Bur)的变化，术后6周，根据诊断标准确诊为成功制 成干眼模型。 3成功制成干眼模型后，治疗组给予T．亚麻酸胶囊灌胃治疗， 50mg，2次，天，共5周。模型组及正常组未予任何处理。用 药后每日观察三组兔角膜荧光素染色、Schirmer试验和泪膜 破裂时间的变化。 4收集兔泪液：在尽量减少人为刺激的条件下，分别取正常 组、对照组和治疗组1、3、6、9、11周兔的泪液，分别用 中文摘要 放免法及酶免法检测泪液中IL-6、TNF．a的含量。 5术后11周处死三组兔，取兔角膜及结膜组织行病理切片 检查，采用放免法及酶免法检测三组兔角膜、结膜组织匀浆 在三组兔角膜结膜组织的表达情况。 6本实验数据平均值用；±s表示，采用单因素方差分析方法 和两样本t检验，SPSSl2．0软件包进行统计学分析，得出其 临床意义。 结果 I试 1根据制作蒸发过强型兔干眼模型前后测量Schirmer 验、BUT、荧光素染色的变化(p0．01)及干眼诊断标准，统 计学结果显示到第6周时，干眼模型达到诊断标准。用药5 I试验滤纸湿长较 周后观察各项指标显示治疗组兔Schirmer 对照组增加，泪膜破裂时间延长，荧光素染色评分下降，经 统计学处理有显著性差异(p0，01)。 2术后6周三组兔泪液中IL-6、TNF．a含量对比，对照组与 差异(p0．001)。对照组与治疗组比较，经统计学处理无显著 性差异(t=0．628，p0．05)。 3术后1l周组织病理学观察：对照组角膜上皮细胞层次增 加，表面扁平细胞不规则缺失，基质层水