胚胎干细胞对博霉素所致小鼠肺损伤的治疗作用初探.pdf

胚胎干细胞对博莱霉素所致小鼠肺损伤的治疗作用初探 摘要 胚胎干细胞对博莱霉素所致小鼠肺损伤的治疗作用初探 摘 要 stemcalls 目的比较三种不同种类的胚胎干细胞(embryonicESC)即C57BL／ 出治疗作用最佳的细胞，并研究多次注射该细胞对肺损伤的治疗作用，为以后的研究 提供参考。 方法一、探索适合本研究的博莱霉素剂量1、动物分组：C57BL／6J雌性小鼠40 只，根据气管内注射博莱霉素剂量分别命为实验组l、2、3组，每组各12只；对照 组4只，共四组；2，动物模型制作：实验1、2，3组分另Ⅱ经气管注入6mg／kg、8mg／kg、 lOmg／kg博莱霉素，对照组气管内注入生理盐水；3、观察指标：小鼠存活情况、体 重变化以及肺组织的病理改变。二、单次经尾静脉移植胚胎干细胞对博莱霉素诱导的 小鼠肺组织损伤的治疗作用探索l、动物分组：C57BL／6J雌性小鼠50只，随机分为 五组，分别为：空白对照组、模型组、模型+C57BL／6J胚胎干细胞组、模型+S8一 胚胎干细胞组、模型+人胚胎干细胞组，每组10只：2、动物模型制作及胚胎千细胞 移植：除空白对照组外，其余四组均经气管给予博莱霉素制做肺损伤模型，三组干细 细胞，S8胚胎干细胞和人胚胎干细胞，模型组给予相同体积的生理盐水。3、观察指 标：小鼠生存时间、肺组织病理变化、肺组织羟脯氨酸含量的测定和于细胞肺内定植 情况检测。三、两次经尾静脉移植胚胎干细胞对搏莱霉素诱导的小鼠肺损伤的治疗作 为：博莱霉素模型组(简称：模型组)和实验l组(单次移植S8ESC)以及试验2组 (两次移植S8ESC)；2、动物模型制作及胚胎干细胞移植：S8ESC移植组小鼠在造模 lO／ml的S8ESC，模型组给予相同体积的生理盐 后一小时，分别经尾静脉移植1．OX 水，试验2组在造模后第三天再次注入S8ESC，模型组以及试验l组给予相同体积的 生理盐水；3、观察指标：小鼠生存时间、肺组织病理变化、肺组织羟脯氨酸含量的 胚胎干细胞对博莱霉素所致小鼠肺损伤的治疗作用初探 摘要 测定。 结果一、博莱霉素剂量的探索结果：小鼠气管内滴注博莱霉素，可以造成 C57BL／6小鼠的间质增生和肺组织实变，这种病变给药l周即可出现，2周后加重， 并且各实验组相继有小鼠发生死亡，大部分于试验后7．12天死亡，其中实验3组未 及实验终点(14天)即全部死亡；8 mg／kg组比6mg／kg组病变明显。两种剂量可酌 情选用，本课题以观察胚胎干细胞对博莱霉素所致小鼠肺损伤的治疗效果为主要目 的，故选8mg／kg为宜。二、单次经尾静脉移植胚胎干细胞对博莱霉素诱导的小鼠肺 组织损伤的治疗作用探索：l、死亡率比较：三组胚胎干细胞(ESC)给予组小鼠第 轻于模型组，其他干细胞移植组与模型组相似。3、肺组织羟脯氨酸含量：S8一ESC移 干细胞移植后分别于l、3、12、和24小时取材，均可检测到其在肺内停留的信号， 但以3小时取材组信号最强。3天后肺内所有干细胞信号消失。三、两次经尾静脉移 植胚胎干细胞对博莱霉素诱导的小鼠肺损伤的治疗作用探索：1、死亡率比较；试验 2组14天及28天的死亡率均低于对照组以及试验1组(试验2组分别为70％、90％， 试验1组与对照组无明显差异)；2、病理变化：移植组肺组织病理变化明显轻于模型 组，而试验2组的病理损害比试验l组轻；3、肺组织羟脯氨酸含量；移植2组明显 低于模型组以及移植l组(尸值分别为0．004，o．Ol和0．048，o．05) 结论移植S8胚胎干细胞可以有效的提高C57BL／6J小鼠肺组织对博莱霉素的耐 受性，减轻肺组织的急性期损伤。 关键词肺损伤，博莱霉素，胚胎干细胞 作 者胡洋 指导老师李惠萍 Ⅱ