辛伐他汀对2型尿病状态下心肌bcl-2、p53基因表达的影响.pdf

中文摘要 辛伐他汀对2型糖尿病大鼠心肌细胞Bcl．2、P53基 因表达的影响 摘 要 目的：糖尿病患者发生心力衰竭的比例显著高于非糖尿 病患者．其中糖尿病心肌病是其原因之一，而心肌细胞凋亡 在糖尿病心肌病的发生、发展过程中起一定作用。本文主要 从Bcl．2、P53基因及蛋白方面着手，观察糖尿病状态下，心 肌细胞这两个基因会出现哪些变化。 辛伐他汀(舒降之)属于3．羟基．3．甲基戊二酰辅酶A 好的降低血脂的功能，据报道还有以下作用：(1)改善血管 内皮功能，(2)抑制粥样斑块炎症反应，(3)增加粥样斑块 稳定性，(4)抑制血栓形成等。据文献报道舒降之除了上述 作用外，还能影响细胞的生长、增殖等，而且研究表明他汀 类降脂药对于脑血管具有保护作用，那么，对于心血管系统 是否具有同样的保护作用呢?二甲双胍是临床上的经典用 药，在糖尿病的防治中有着广泛的应用，其对心脏是否存在 保护作用呢，尚不知晓。 基于上述目的，本实验采用高脂饮食诱导出胰岛素抵抗 再加小剂量STZ的方法，成功诱导出2型糖尿病大鼠模型， 在此基础上给予辛伐他汀灌胃，以二甲双胍作为对照。在此 基础上，观察心肌细胞中P53、Bcl．2基因及其蛋白的表达是 否发生变化；以此来探明辛伐他汀对于糖尿病心肌病的保护 作用，对糖尿病患者发生心力衰竭的防治具有重要的理论和 中文摘要 实践意义。 方法： 1实验动物分组及标本处理 本实验大鼠共分五组，正常组、胰岛素抵抗组、糖尿病 组、二甲双胍组和辛伐他汀组。具体方法为：8周龄雄性SD 大鼠35只，体重200．220克，适应性喂养一周后，分为正常 对照组5只和高脂组30只，对照组喂普通饲料，高脂组喂 养高脂饲料，其中脂肪主要为猪油，热量组成为碳水化合物 占20．1％，脂肪占59．8％，蛋白质占20．1％。8周后，通过口 tolerance 服糖耐量试验(oral test，OGTT)证实高脂 glucose 组大鼠产生了胰岛素抵抗，从中分成5只作为胰岛素抵抗组， 射72h后尾静脉采血，测定禁食6h后的空腹血糖，血糖 值7．8mmol／L的大鼠纳入糖尿病组，随机分为单纯糖尿病组 7只，二甲双胍组8只，辛伐他汀组8只，继续用高脂饲料 喂养6周，同时二甲双胍组和辛伐他汀组每天给予灌胃，剂 水灌胃。实验动物处死前禁食12h，次日25％乌拉坦6ml／kg 腹腔注射麻醉，打开胸腔，迅速取出心脏，剪去血管和心脏 周围结缔组织，用4℃预冷生理盐水冲洗，立即置于液氮中， 分装后．80℃冻存，用于提取总RNA，测定心肌组织中Bcl．2 和P53基因的表达。 2血中葡萄糖的测定 用氧化酶法测定。 3Bcl．2、P53基因mRNA表达的测定 中文摘要 mRNA的相对表达量。 照，RT-PCR法测定心肌p53、bcl．2 4Bcl．2j P53基因相应蛋白表达的测定 提取心肌组织的总蛋白，以B．actin作为内参照测定各 蛋白的相对表达量。 5数据处理 所有数据均用x+s表示，采用SPSS13．0软件进行统计 学处理分析，组间比较用单因素方差分析检验，检验以 P0．05为差异有显著性意义。 结果： l造模 1．1 OGTT试验高脂组各个时间点血糖值均高于对照组， 1)。 差异均有统计学意义(氏O．0 1．2大鼠的血糖 STZ腹腔注射后3天，检测高脂组大鼠空腹血糖值均符 抵抗组为5．25±O．43mmol／L，差异有统计学意义(PO．01)， 说明造模成功。 2 Bcl．2、P53基因mRNA的相对表达量的变化 2．1Bcl．2mRNA的相对表达量 4-0．1 分析结果正常对照组为O．588228732，糖尿病组为