1株饲用木聚糖酶产生菌的分离、鉴定、发酵、酶学性质及应用.pdfVIP

— １９６— 江苏农业科学　２０１４年第４２卷第１０期 郄卫那，张兰英，何　健，等．１株饲用木聚糖酶产生菌的分离、鉴定、发酵、酶学性质及应用［Ｊ］．江苏农业科学，２０１４，４２（１０）：１９６－２００． １株饲用木聚糖酶产生菌的分离、鉴定、 发酵、酶学性质及应用 １ ２ １ １ 郄卫那 ，张兰英 ，何　健 ，贺　芹 （１．南京农业大学生命科学学院／农业部农业环境微生物工程重点开放实验室，江苏南京２１００９５； ２．江西省南康市第一小学，江西南康３４１４００） 　　摘要：以木聚糖为唯一碳源，从长期堆放枯枝败叶的土壤中筛选能够高效降解木聚糖的菌株，并对该菌的产酶条 件和酶学性质进行研究。分离得到 １株酶活性较高且产酶相对稳定的菌株，鉴定为尖孢镰刀菌，命名为Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍＭＪ２３。研究表明，木聚糖、酵母粉是该菌的最适培养底物，在最适培养条件下，该菌株所产木聚糖酶活力可 ２＋ ２＋ 达１８６Ｕ／ｍＬ；木聚糖酶的最适作用温度、ｐＨ值分别为５５℃、６，５５℃保温３ｈ，酶活力仍可维持９０％以上；Ｃａ 、Ｆｅ 、 ２＋ ２＋ ２＋ Ｍｎ 、Ｔｗｅｅｎ８０和聚乙二醇对木聚糖酶活力有较强促进作用，Ｃｕ 、Ｚｎ 、ＥＤＴＡ、尿素和ＳＤＳ则会抑制酶活，其中ＳＤＳ 的抑制作用最强。模拟动物体内对饲料中半纤维素组分的消化，木聚糖酶的添加可使猪饲料中木糖生成量提高 ２８％，鸡饲料中木糖生成量提高１６％，表明该菌株所产木聚糖酶具有用作饲料添加剂的可能性。 　　关键词：木聚糖酶；酶学性质；产酶条件；饲料；尖孢镰刀菌 　　中图分类号：Ｓ１８２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１４）１０－０１９６－０４ 　　我国作为重要的农业大国，所产玉米、小麦、大麦、高粱等 １　材料与方法 主粮以及由此形成的诸如麸子、秸秆、稻壳等农副产品是家畜 植物性饲料的主要来源，但其中所含的木聚糖等非淀粉多糖 １．１　试验材料 成分不能被非反刍动物利用。这主要是因为单胃动物消化道 试验土样采集自江西省南康市长期堆放秸秆、枯枝落叶 内缺乏植酸酶、纤维素酶和非淀粉多糖酶等相关酶；并且植物 以及施用过沤肥的土壤。 性饲料中存在的 －葡聚糖、阿拉伯木聚糖等物质会增加食 １．２　仪器与试剂 β 糜黏度，同时影响营养物质的吸收降解，从而降低饲料的利用 ＨｉｍａｃＣＲ－２１Ｇ 高速冷冻离心机，Ｈｉｔａｃｈｉ公司；７２２光 Ⅱ 率。木聚糖酶的添加可降解饲料中的木聚糖成分，提高动物 栅分光光度计，上海分析仪器总厂；ＰＣＲ扩增仪，北京东胜创 对木聚糖等物质的利用率，而且生成的木糖等小分子物质减 新生物科技有限公司。 轻了肠胃负担，促进了机体对食物的消化及对营养物质的吸 真菌提取ＤＮＡ试剂盒，购自生工生物工程（上海）股份 收；同时，饲料利用率的提高可以减少饲料的投喂量，提高料 有限公司；木聚糖，购自Ｓｉｇｍａ公司；Ｄ－木糖、３，５－二硝基水 肉比，降低成本，进而提高经济效益。木聚糖酶具有广泛的微 杨酸（ＤＮＳ）、酒石酸钾钠等均为分析纯，购自国药集团化学 生物来源，包括各种真菌、放线菌、细菌等，其中较为重要的产 试剂有限公司；麸皮、玉米芯、豆粕、菜籽粕、棉粕、鱼粉，市售； 木聚糖酶的微生物包括曲霉（ 其他试剂均为国产分析纯。