ELISA法检测不同条件下中华绒螯蟹中br恩诺沙星的残留量.pdfVIP

江苏农业科学　２０１５年第４３卷第１１期 — ３９９— 徐　逍，杨彩根，付监贵，等．ＥＬＩＳＡ法检测不同条件下中华绒螯蟹中恩诺沙星的残留量［Ｊ］．江苏农业科学，２０１５，４３（１１）：３９９－４０３． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１５．１１．１２５ ＥＬＩＳＡ法检测不同条件下中华绒螯蟹中 恩诺沙星的残留量 １，２ １ １ １ １ 徐　逍 ，杨彩根 ，付监贵 ，侍苗苗 ，宋学宏 （１．苏州大学医学部基础医学与生物科学学院，江苏苏州２１５１２３；２．江苏中洋集团股份有限公司，江苏海安２２６６００） 　　摘要：水温２５℃时，在不同给药次数、不同健康状况条件下对中华绒螯蟹口灌恩诺沙星（１０ｍｇ／ｋｇ），应用酶联免 疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）法测定灌药后５、１０ｍｉｎ及０．５、１、２、４、８、１２、２４、４８、９６、１６８、２４０ｈ中华绒螯蟹血淋巴、肌肉、肝胰 腺中恩诺沙星残留量，用药代动力学软件３Ｐ９７计算药代动力学参数并拟合房室模型。结果表明：（１）单次和多次口 灌（连续口灌３ｄ，１次／ｄ）条件下，单次口灌分布和消除快于多次口灌，各组织中恩诺沙星峰值含量从高到低依次为： 肝胰腺、血淋巴、肌肉；（２）单次口灌健康的和感染嗜水气单胞菌的中华绒螯蟹后，与健康蟹相比，染菌蟹各组织中恩 诺沙星含量较低、吸收较慢，但分布和消除快，恩诺沙星在染菌蟹各组织中的含量从高到低依次为：肝胰腺、肌肉、血淋 巴；（３）３Ｐ９７软件分析结果表明，不同健康状况及不同口灌次数下中华绒螯蟹血淋巴、肌肉、肝胰腺中恩诺沙星的代谢 规律均符合一级吸收二室开放模型。 　　关键词：中华绒螯蟹；恩诺沙星；ＥＬＩＳＡ；药代动力学 　　中图分类号：ＴＳ２０７　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１５）１１－０３９９－０５ 　　恩诺沙星（ＥＮＲ）由德国拜尔公司创制，１９８７年上市，是 法进行了不同健康状况及不同口灌次数下ＥＮＲ在中华绒螯 ［１］ 动物专用氟喹诺酮类药物 ，它可以快速杀灭细菌或霉菌等 蟹体内的药物代谢动力学研究，以期为水产动物疾病防治中 具有ＤＮＡ或ＲＮＡ和蛋白质合成能力的病原体，并具有毒性 合理使用ＥＮＲ、有效控制中华绒鳌蟹养殖过程中常见的细菌 ［２］ 低、抗菌谱广、细菌耐药突变率低等特点 。但是ＥＮＲ代谢 性疾病、保障水产品安全提供更加科学的用药依据。 缓慢，在动物体的肌肉、肝脏和肾脏等组织中易残留，长期摄 １　材料与方法 入可引起关节和软骨损伤，造成泌尿系统、消化系统甚至神经 ［３］ 系统的损害 。 １．１　药品与试剂 中华绒螯蟹（Ｅｒｉｏｃｈｅｒｓｉｎｅｎｓｉｓ）是我国发展迅速、经济价 恩诺沙星标准品（ＥＮＲ，９８．０％），购自德国Ｄｒ．Ｅｈｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒ 值较高的优势水产品，近年来其养殖规模不断扩大，其细菌性 ＧｍｂＨ公司；分析纯氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、柠檬酸、 疾病也不断暴发，ＥＮＲ的频繁使用不仅容易引起细菌的耐药 一水葡萄糖、活性炭、无水甲醇，购自国药集团化学试剂有限公 司； 性，而且导致药物残留，影响水产品的质量与安全。目前，实 Ｔｗｅｅｎ－２０、邻苯二胺（ＯＰＤ），购自北京索莱宝科技有限公 际生产中表明，不同的给药方式对中华绒鳌蟹细菌性疾病的 司；辣根酶标记的羊抗鼠ＩｇＧ，购自美国Ｂｉｏｗｏｒｌｄ公司。 ［４］ 防治效果和药物残留有着重要影响 。此外，ＥＮＲ在中华绒