利用SSR技术分析辽宁省32个骨干玉米br自交系的遗传多样性.pdfVIP

江苏农业科学　２０１３年第４１卷第１１期 — ２９— 阮燕晔，郭　瑞，崔震海，等．利用ＳＳＲ技术分析辽宁省３２个骨干玉米自交系的遗传多样性［Ｊ］．江苏农业科学，２０１３，４１（１１）：２９－３２． 利用 ＳＳＲ技术分析辽宁省３２个骨干玉米 自交系的遗传多样性 阮燕晔，郭　瑞，崔震海，张立军 （沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁沈阳１１０８６６） 　　摘要：利用简单序列重复（ＳＳＲ）标记技术，选用ＮＹ／Ｔ１４３２—２００７《玉米品种鉴定ＤＮＡ指纹方法》的２０对引物以 及本实验室前期筛选的７对引物，对辽宁省３２个骨干玉米自交系的血缘关系进行了分析。结果表明，２７对引物均具 有多态性，共扩增出１２５个等位基因，每对引物检测到３～１０个等位基因，平均为４．６３个等位基因；其多态性信息量 ＰＩＣ值为０．３４８１（ｐｈｉ０５１）～０．８６４５（ｕｍｃ０１９１），平均值为０．６２４７。非加权组平均法（ＵＰＧＭＡ）聚类分析表明，３２个自 交系被划分为５个类群，基本与系谱一致。对以３２个自交系为父本、母本的２４个杂交种进行杂种优势模式分析表 明，瑞德×ＰＢ杂种优势模式所占比例最高。 　　关键词：ＳＳＲ；玉米自交系；多态性；聚类分析；辽宁省 　　中图分类号：Ｓ５１３．０３５．３　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１３）１１－００２９－０４ 　　在世界玉米主产区中，普遍存在玉米种质资源匮乏及资 ［１］ １　材料与方法 源遗传基础狭窄的问题 。近年来在辽宁省玉米育种中，部 ［２］ 分自交系被反复利用 ，不仅不利于辽宁省玉米生产安全， １．１　材料 也导致辽宁省种质资源血缘关系复杂，种质间的系谱关系不 选取辽宁省玉米生产中具有代表性的３２个骨干自交系， 清楚，不利于后续育种工作进行。系统研究种质的遗传关系， 各自交系基本信息见表 １。本研究选用 ＮＹ／Ｔ１４３２—２００７ 划分杂种优势群和分析杂种优势模式是玉米育种的重要内 《玉米品种鉴定 ＤＮＡ指纹方法》所指定的基本核心引物２０ 容，分子标记技术是解决这些问题的有力工具。简单序列重 对以及本实验室前期筛选的ＳＳＲ引物７对，由大连宝生物公 复（ＳＳＲ）技术是建立在ＰＣＲ反应基础上的共显性遗传标记， 司合成。 具有简便、快捷、稳定、多态性高的特点，近年来得到了广泛应 １．２　方法 ［３－６］ １．２．１　ＤＮＡ提取　在玉米幼苗长到一叶一心时采集样品， 用 。研究者利用ＳＳＲ技术对多个省份的部分审定品种和 骨干自交系进行了遗传多样性和指纹图谱方面的分析。王伟 采用试剂盒法（赛百盛公司生产）提取大量玉米基因组ＤＮＡ， 等构建了２０００年以来贵州省审定的４８个玉米杂交种及其亲 用分光光度计检测 ＤＮＡ浓度和质量。将 ＤＮＡ浓度调至 本的ＳＳＲ数字化指纹图谱，为玉米品种及其亲本的纯度和真 １０ｎｇ／Ｌ备用。 μ ［７－８］ １．２．２　ＳＳＲ扩增　ＰＣＲ反应总体积为 １０ Ｌ：ｄｄＨＯ 实性鉴定以及知识产权保护提供了重要参考 。王明泉等 μ ２ 利用ＳＳＲ技术对黑龙江省部分审定玉米品种亲本自交系进 ２＋ ６．１ Ｌ，１０×Ｂｕｆｆｅｒ（ｍｇ ）１．０ Ｌ，ｄＮＴＰ（２．５ｍｍｏｌ／Ｌ） μ μ 行了遗传多样性分析，结果表明黑龙江省推广品种的亲本自 ０．８ Ｌ，Ｔａｑ（５Ｕ／Ｌ