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s．腺苷蛋氨酸对大鼠肝脏缺血再灌注损伤线粒体的保护作用 S一腺苷蛋氨酸对大鼠肝脏缺血再灌注损伤 线粒体的保护作用 专 业：肝脏移植 硕士研究生：郭志刚 指导教师：何晓顺 中文摘要 目的 在肝移植手术的过程中，供肝不可避免地要经历缺血再灌注过程。 肝脏对缺血耐受力较低，肝脏缺血再灌注后，由于脂质过氧化反应增强、氧自由 基的大量形成等损伤线粒体而最终导致肝细胞不同程度的损伤和代谢紊乱。s一 腺苷蛋氨酸(SAM)是存在于人体所有组织和体液中的一种生理活性分子，它 作为甲基供体和生理性巯基化合物的前体，参与体内重要的生化反应，对于肝细 胞再生、分化以及调节肝细胞对于各种损伤的敏感程度均起非常重要的作用。然 而，国内文献多报道SAM在防【r胆汁淤积方面的作用，而在它对于肝细胞缺血 再灌注损伤是否也存在保护作用方面研究尚少。因此，本实验拟利用大鼠肝脏缺 血再灌注模型，以肝细胞的微观结构线粒体作为研究对象，对比观察实验动物同 一时间点的临床生化改变、线粒体酶学变化、能量代谢的变化以及超微结构的改 变等方面的变化规律，从而探索SAM预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 及其部分机制，为指导今后的实验研究及其临床应用提供科学依据。 方法健康雄性清洁级SD大鼠54只，随机分为3个组，每组18只，即 为对照组、缺血再灌注组(I／R组)和s．腺苷蛋氨酸预处理组(SAM组)。每组 按缺血后再灌注不同时间点分别再分为O、l、6小时组。在上述三个时间点抽取 下腔静脉血并切取肝组织制备线粒体，检测血清Aul、AST和线粒体GSH、 超微结构的变化。实验结果按同一时间点I／R组与对照组比较，SAM组与I／R组 比较。 s．腺苷蛋氨酸对大鼠肝脏缺血再灌注损伤线粒体的保护作用 组，线粒体GSH、SOD、ATP等水平显著低于对照组；而SAM组血清中的ALT、 ATP等水平与I／R组对比均有明显的升高，这种差异有显著的统计学意义。电镜 观察，对照组肝细胞线粒体结构改变不明显，大多无肿胀，线粒体膜完整。IJR 组可见线粒体数量减少，肿胀明显，嵴模糊不清，基质密度低，线粒体膜部分或 完全崩解。部分肝细胞核固缩，在肝细胞之问还可见到凋亡小体。SAM组与相 同时间点I／R组对比，肝细胞超微结构改变较轻，大部分线粒体轻度肿胀，呈圆 形，仅有少数线粒体膜不完整，未见到肝细胞核固缩和溶解现象。 结论 SAM能增强超氧化物歧化酶的活力，清除氧自由基，抑制脂质过 氧化反应。SAM能抑制次黄嘌呤核苷向次黄嘌呤转变从而提高肝脏腺苷的浓 度，有利于细胞内ATP的产生，最终提高线粒体的能量代谢水平。SAM能增加 线粒体GSH池的含量并消弱氧化应激反应，从而有效地减轻肝脏的缺血再灌注 损伤。 关键词：肝移植、s一腺苷蛋氨酸、缺血再灌注、线粒体 s一腺苷蛋氨酸对大鼠肝脏缺血再灌注损伤线粒体的保护作用 could S-adenosylmethionineprotect inducedMitochondrialinratliver injury Liver Major Transplantation Guo PostgraduateZhigang XiaoshunHe Supervisor Abstract Ischemic an event objective reperfusion(I／R)isunavoidablythroughout and