中国hiv-1染疾病长期不进展者ccr2-64i、sdf1-3′a和ccr5δ32的基因变异研究.pdfVIP

中国医科大学研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及 取得的研究成果．据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或 其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研 究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意． 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任． 论文作者签右：乏越塑日期： 州．t-、哆 中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在 攻读学位期闽论文工作的知识产权单位属中国医科大学．本人保证毕业离 校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师 为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学．学校有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅．学 校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩 印或其他手段保存论文． 论文作者签名： 指导教师签名： 整 ，…+——————…、 } 中文论著摘要 ； 、 一一…．．一一， 中国HIV一1感染疾病长期不进展者CCR2—64I、 SDFl—3A和CCR5A32的基因变异研究 目 的 本文首次用PCR—RFLP方法对机体遗传背景和感染亚型不同于国外 的LTNP疾病进程的影响。 方 法 1．研究对象 56例HIV／AIDS患者分别来自辽宁省和吉林省，均经中国医科大学附 属第一医院艾滋病确认实验室Westernblot实验确认。其中17例为长期不 1137／ul，有不同程度的临床症状。所有病例均为汉族。 2．CD4细胞绝对值计数 CIM／CD8／CD3 将20ul 胞绝对值及相应比值等。 3．DNA提取 LC PURETOTLENUCLE． 各组标本抗凝外周静脉血200ul，用MAGNA ACID PURE IC ISOLATION KIT试剂盒在MAGNALC全自动核酸提取仪提 ·1· 取基因组DNA，总核酸溶于100ul双蒸水中。 4．CCR5△32基因的PCR分析 GATCTCAAAAAGAAGGTCT3 j反向引物序列：5 AGCCTCACA 察结果。 5．CCR2—64I基因的PCR／RFLP分析 正向引物序列，5 3j反向引物序 TGCACATTGCATTCCcAAAGAccC3 列：5 jPCR反应条件：94℃变性5rain； 内切酶于55。C酶切2h，酶切后取酶切产物2ul进行2％琼脂糖凝胶电泳观 察结果。 6．SDFl—3A基因的PCR／RFLP分析 正向引物序列：5℃AGTCAACcTGGGcAAAGCC3j反向引物序列：5 GAAAGC们-rGGACCTGAGAGTCC3 j 酶于37℃酶切2h，酶切后取酶切产物2ul进行2％琼脂糖凝胶电泳观察结 果。 7．统计方法：用SPSS统计软件统计分析，x2检验计算两组突变频率的 ratio，OR)计算。