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SELDI蛋白芯片技术筛选乙肝后肝硬化与原发性肝癌腹水蛋白标记物的研究 硕士研究生论文 SELDI蛋白芯片技术筛选乙肝后肝硬化与原发 性肝癌腹水蛋白标记物的研究 中文摘要 在我国肝癌死亡率位居恶性肿瘤死亡率的第二位，死于肝癌的患者占 全球肝癌死亡人数的53％。尽管肝癌的临床诊治及基础研究均取得了丰硕 的成果，但其总体预后并未得到显著改善，难以早期诊断而失去手术时机 是重要原因之一。虽然甲胎蛋白仍然是肝癌早期诊断的最好指标，但其敏 感度和特异性均不高，因此寻找一种简单、快速、高灵敏度和高特异性的 诊断方法已成为临床医学的迫切需要。 目前随着分子生物学技术的飞速发展，生命科学研究重点已经从结构 基因组学转移到蛋白质组学上来。其中表面增强激光解析离子化飞行时间 方法，其具有高通量性及高灵敏度，为研究疾病的发生、发展以及其早期 生物标记物的检测，提供了强有力的平台，目前已用于多种疾病的检测和 诊断的研究。 本课题旨在利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术 两组的蛋白质表达谱，分析比较两组差异表达蛋白并构建相应的诊断模型 (pattern)，以其能从腹水中筛选乙肝后肝硬化患者和原发性肝癌患者蛋白质 标志物及发现可以用于乙肝后肝硬化患者和原发性肝癌患者诊断的蛋白质 组学构型，并为进一步研究提供线索和新的思路。 第一部分蛋白芯片及的选择 SELDI蛋白芯片技术筛选乙肝后肝硬化与原发性肝癌腹水蛋白标记物的研究 硕士研究生论文 化和原发性肝癌患者腹水蛋白质指纹图谱研究的芯片种类。 方法：选择乙肝后肝硬化和原发性肝癌患者腹水各12例，采用CMlO、 腹水蛋白的最佳芯片。 实验组捕获的蛋白峰数分别为：乙肝后肝硬化组53个；原发性肝癌组57个。 结论：CMlO能得到更多的乙肝后肝硬化和原发性肝癌患者有显著意义 的差异蛋白峰值，能更好的应用于本课题的研究。 第二部分乙肝后肝硬化患者和原发性肝癌腹水蛋白标记物筛选 和诊断模型的建立 目的：寻找乙肝后肝硬化和原发性肝癌相关蛋白质及治疗靶点，初步 构建乙肝后肝硬化患者与原发性肝癌患者诊断模型，并探讨其临床应用的 可行性。 方法：收集30例乙肝后肝硬化患者、29例原发性肝癌患者新鲜腹水， CiphergenBiosystems软件对上述两组波谱进行两两比较分析。 结果： 1、在乙肝后肝硬化患者组与原发性肝癌组比较中发现24个蛋白峰在 两组间的比较差异有统计学意义(PO．05)。与乙肝后肝硬化患者腹水蛋白质 谱相比，原发性肝癌患者腹水中16个差异蛋白峰表达上调，8个差异蛋白 峰表达下调。 2、软件从这24个差异蛋白峰中选取6个有显著差异的标志蛋白组合样 SEIDI蛋白芯片技术筛选乙肝后肝硬化与原发性肝癌腹水蛋白标记物的研究 硕士研究生论文 预测值为80．00％(24／30)。 结论： 1、乙肝后肝硬化患者组与原发性肝癌组间腹水蛋白图谱表达差异有统 计学意义。肝细胞恶变可能在肝细胞再生过程中发生，即经肝细胞损害引 起再生或不典型增生，此过程可能与这16个表达上调的差异蛋白峰相关。 2、建立的诊断模型，能将乙肝后肝硬化患者与原发性肝癌患者进行有 效地区分。 肝硬化和原发性肝癌临床诊断和治疗监测上将是一种很有前途的方法。 关键词：乙肝后肝硬化，原发性肝癌，蛋白质组，表面增强激光解析 离子化飞行时间质谱，蛋白质芯片 SELDI蛋白芯片技术筛选乙肝后肝硬化与原发性肝癌腹水蛋白标记物的研究 硕士研究生论文 withrelationto Screen biomarkers hydrogaster hepatic ● _ - 一 ■ 』 l■ ● _ ●’ Clrrhoslsand carclnomaresearchuse0I neDat0CeIJar Dy SELDI technolo