磷酸肌酸钠对人巢癌细胞株skov3侵袭能力的影响及其机制研究.pdf

中文摘要 磷酸肌酸钠对人卵巢癌细胞株skov3侵袭能力的影 响及其机制研究 摘 要 目的：采用体外实验，研究磷酸肌酸钠(Creatine Phosphate 移所产生的作用。观察磷酸肌酸钠对skov3细胞株侵袭、迁 移影响的结果，探讨磷酸肌酸钠影响肿瘤细胞侵袭、迁移的 可能机制，为应用该药物治疗化疗心脏毒性提供实验依据。 方法：体外培养人卵巢癌细胞株skov3，分为空白对照 组及不同浓度的药物处理组。取生长状态良好的对数期细 胞，采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT比色法)检测磷酸肌 酸钠对人卵巢癌细胞株skov3黏附能力的影响；采用 Transwell小室法检测磷酸肌酸钠对该细胞株迁移能力、侵袭 能力的影响作用；采用流式细胞仪测定磷酸肌酸钠对该细胞 采用逆转录．聚合酶链反应(revers PCR， transcription mRNA表达水平的影响。 结果：MTT比色法分析检测黏附能力实验显示：skov3 浓度药物处理组OD值无显著变化，结果无统计学差异 (胗O．05)，中、高浓度药物处理组OD值均出现显著下降， 结果有统计学差异(氏O．05)，但中、高浓度药物处理组之 间OD值无显著变化，结果无统计学差异(尸O．05)；计算粘 中文摘要 7％， 附抑制率分别为O％，0．720／社0．92％，36．470／社3．1 37．060／社3．30％，低浓度药物处理组的细胞粘附抑制率较空白 组无显著变化，结果无统计学差异(PO．05)，中、高浓度 药物处理组的细胞粘附抑制率较空白组显著升高，结果有统 计学差异(尸O．05)，但组间无显著变化，结果无统计学差 胞外基质成分Matrigel的粘附作用均有显著抑制。 与空白对照组比较，低浓度药物处理组穿膜细胞数较空白对 照组无显著变化，结果无统计学差异(尸O．05)，中、高浓 度药物处理组穿膜细胞数量较空白对照组均显著降低，结果 有统计学差异(尸O．05)，但中、高浓度药物处理组之间穿 膜细胞数量无显著变化，结果无统计学差异(PO．05)；计 侵袭能力有显著性抑制作用。 与空白对照组比较，低浓度药物处理组穿膜细胞数较空白对 照组无显著变化，结果无统计学差异(pO．05)，中、高浓 度药物处理组穿膜细胞数量较空白对照组均显著降低，结果 有统计学差异(PO．05)，但中、高浓度药物处理组之间穿 膜细胞数量无显著变化，结果无统计学差异(胗O．05)；计 33．5 1％士2．90％；即中、高浓度药物处理组对skov3细胞株的 迁移能力有显著性抑制作用。 流式细胞仪测定细胞蛋白表达：skov3细胞株药物处理 中文摘要 (FI)表示四种蛋白表达的相对含量。所有样品检测均以 平与空白对照组相比显著升高，结果有统计学差异 白的表达水平与空白对照组相比显著降低，结果有统计学差 MMP．9蛋白的表达水平与空白对照组相比均无显著变化，结 果无统计学差异(胗O．05)。 mRNA的表达水平，药物处理组与空白对照组均可见明显而 清晰的特异性条带。应用美国FOTODYNE凝胶成像分析系 统分析显示，反映nm23．H1mRNA表达水平的 mRNA表达水平的 0．04、0．65±O．03，反映C．myc mRNA的表达水平与空白对照组相比显著升高，结果有统计 mRNA的表达水平与空白对照组相比显著降低，结果有统计 中文摘要 学差异(P．o．05)。 结论：1一定浓度的磷酸肌酸钠具有抑制人卵巢癌细胞 株skov3黏附、迁移、侵袭的作用。2一定浓度的磷酸肌酸 钠可通过上调nm23．hlmRNA和蛋白表达水平抑制人卵巢 癌细胞株skov3黏附、迁移、侵袭。3一定浓度的磷酸肌酸 mRNA和蛋白表达水平抑