胡椒碱对大鼠局性脑缺血的神经保护作用.pdfVIP

中文摘要 胡椒碱对大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用 摘 要 目的：观察胡椒碱对急性缺血性脑损伤是否具有脑保 护作用，初步探讨其作用机制，为研究新的脑保护剂提供实 验依据。 方法：随机将健康成年雄性SD大鼠32只，体重 (280—320)g，分为假手术组、生理盐水组、胡椒碱组、胡椒 碱溶媒组，每组8只。生理盐水组、胡椒碱组、胡椒碱溶媒 组动物采用Longa颈内动脉线栓法制备大鼠MCAO局灶性 脑缺血模型；假手术组动物除插入线栓长度10mm，其余 手术步骤同MCAO模型制备。假手术组和生理盐水组动物 给予生理盐水7ml／kg灌胃；胡椒碱溶媒组只给予胡椒碱溶 媒(灭菌注射用水、无水乙醇、聚乙二醇400混合液)7ml／kg 椒碱组动物灌胃给药；各组均于术后0．5小时灌胃给药，每 日1次，连续3天。每组大鼠于脑缺血后2小时、24小时、 48小时、72小时采用Zea Longa评分法进行神经功能评分。 术后72小时断头取脑，做2mm厚的冠状切片，进行TTC 染色，测量梗死体积。另择32只大鼠，分组及处理方法同 前，于脑缺血24小时麻醉，4％多聚甲醛磷酸缓冲液灌注后 断头取脑，取视交叉前缘作2mm厚冠状切片，石蜡包埋后 相邻切片行TUNEL染色观察神经细胞凋亡情况、免疫组织 化学检测caspase．3蛋白表达变化。各项指标均为计量资料， 以均数±标准差(；士s)表示。多个样本均数间比较采用单 中文摘要 因素方差分析(F检验)。组间两两比较采用SNK．q方法检 验，以P0．05为有显著性差异判断标准。 结果： 1．神经功能评分 MCAO术后除假手术组外入选大鼠均出现缺血对侧程 度不等的神经功能缺损症状。MCAO术后2h神经功能评分 胡椒碱溶媒组与生理盐水组比较无显著性差异(p0．05)， 胡椒碱组分别与生理盐水组、胡椒碱溶媒组比较神经功能评 分降低，均有显著性差异(pO．05)。表明一定量胡椒碱可 以使大鼠神经功能得到明显的改善，而生理盐水和胡椒碱溶 媒对大鼠神经功能无明显改善。 2．脑梗死体积测定 MCAO术后72小时假手术组未见梗死灶；生理盐水组 计学意义(pO．05)。胡椒碱组分别与生理盐水组、胡椒碱 溶媒组相比均有显著性差异(pO．01)。本结果提示胡椒碱 可显著缩小MCAO大鼠的脑梗死体积，对局灶性脑缺血具 有脑保护作用。 3．TUNEL技术原位标记凋亡细胞 TUNEL染色阳性凋亡细胞在脑组织缺血半暗带区表达 较为集中。假手术组脑组织罕见TUNEL阳性细胞。生理盐 水组、胡椒碱溶媒组、胡椒碱组凋亡细胞数分别为 中文摘要 胡椒碱溶媒组比较无显著性差异(p0．05)。胡椒碱组凋亡 细胞数较生理盐水组和胡椒碱溶媒组显著降低(pO．01)， 但仍较假手术组多。 。4．Caspase．3蛋白表达 Caspase．3蛋白表达阳性细胞主要分布于缺血半暗带 区。假手术组脑组织罕见caspase．3阳性细胞。生理盐水组、 胡椒碱溶媒组、胡椒碱组caspase．3阳性细胞数分别为 椒碱溶媒组比较无显著性差异(PO．05)，胡椒碱组 caspase．3阳性细胞数较生理盐水组和胡椒碱溶媒组显著降 白表达与相应部位细胞凋亡是一致的。 结论：1．应用一定量胡椒碱可以缩小MCAO大鼠脑梗 死体积，改善MCAO大鼠梗死后神经功能缺损程度；具有 一定的脑保护作用。2．应用一定量胡椒碱可以抑制MCAO 大鼠缺血半暗带内的细胞凋亡，这一过程可能与抑制 caspase．3蛋白的表达有关。 关键词：胡椒碱；大鼠；局灶性脑缺血；细胞凋亡；半 胱天冬酶．3；神经保护 英文摘要 The effectof onfocal piperine neuroprotective rats