佐剂性关节炎大转化生长因子β1和白细胞介素6水平的动态观察.pdf

中丈摘 要 佐荆性关节炎大吸转化生长因子p1和白细脑介众 6水平的动态观察 摘 要 目的:类风湿关节炎 (RheumatoidArthritis,RA)是 一系统性、炎症性的自身免疫性疾病，主要特点为慢性、 多关节炎症，其病理学基础为滑膜炎，但目前病因及发病 机制尚不清楚。近年来的研究表明细胞因子在RA的发病 过程中起重要作用，其中转化生长因子01(Transforming GrowthFactor0l,TGF01)和白细胞介素6(Interleukin-6, IL-6)作为两个重要的免疫炎症调节因子，均参与了RA的 发病，但关于其在RA中的表达水平及作用目前尚未完全 明确。本实验旨在成功建立佐剂性关节炎(Adjuvant Arthritis,AA)大鼠模型的基础上，动态观察TGFR1和 IL-6在大鼠血清及滑膜组织中的表达水平，以进一步明确 其表达水平并探讨其在RA发病中的作用，为临床上深入 理解RA的发病机制、寻求更好、更新的判断RA活动性 的指标以及将来的生物制剂的治疗提供一新的思路。 方法:(1)选用45只雄性Wistar大鼠，随机分成9组， 每组 5只，分别命名为I-IX，其中I组为正常对照组， II-IX组分别为AA模型建立后不同时间的实验组，II组 为7d,III组为 14d,IV组为21d,V组为28d,VI组为35d, VII组为42d,VIII组为49d,IX组为56d，其中实验组每只 大鼠给予尾根部皮内注射完全弗氏佐剂(CFA)0.2m!制作 中文 摘 要 AA模型，正常对照组每只大鼠给予尾根部皮内注射生理 盐水0.2m1o(2)于注射后连续观察大鼠的一般情况及关节 炎症表现，并计算关节炎指数 (ArthritisIndex,AI);各 组于规定时间下腔静脉采血，离心备用，集中检测血清 TGFO1和IL-6的水平。(3)分别于规定时间采血处死后取 大鼠双膝关节滑膜组织，10%甲醛溶液固定，石蜡包埋， 切片后行苏木素一伊红 (HE)染色，光镜下观察关节滑膜 衬里层细胞增生、衬里下层炎症细胞浸润以及血管增生等 病理变化，并进行滑膜衬里层细胞层数的测量 (Lining LayerCount,LLC)o(4)对上述滑膜组织进行TGFpISP 免疫组织化学染色，并采用图像分析系统对其表达量进行 定量分析。(5)应用SAS统计软件进行统计分析。 结果:(1)AA大鼠随着关节炎症状的出现及逐渐加重， AI逐渐升高，至28d关节炎症状最明显时，AI达至高峰， 而后随着关节炎症状的逐渐缓解，AI也随之降低，而LLC 则随着病程进展逐渐增加。(2)AA大鼠血清TGF3(1水平 在尚未出现关节炎症状 (AI=O)时即下降，与正常对照组 比较具有显著性差异 (P0.05)，随着AI逐渐增加，血清 TGFp1水平下降愈趋明显，至28dAI达至高峰11寸，TGFp1 水平降至最低，而后随着AI逐渐下降，TGF田水平亦有 所恢复，观察至56d时基木恢复至IF.常水平，与正常对照 组比较无显著性差异 (P0.05);血清IL-6的水平变化与 血清TGFp1的水平变化相反。(3)AA大鼠血清TGFOI 水平与AI呈负相关 (二一0.8258,P0.05),血清IL-6水平 与AI呈正相关 (r=0.8809,P0.05)，血清TGF01,IL-6 中丈 摘 妥 水平n负相关 (r二一0.9599,P0.05)a(4)AA人鼠滑膜组 织TGFO1的表达水平随着滑膜炎的出现一急性期一慢性 期的动态变化，呈现先升高后降低的趋势，在28d滑膜炎 最明显时其表达水平也最高，并且其水平与AI呈正相关 (r--0.8708,P0.05)，与血清 TGF01水平呈负相关 (r=-0.8217,P0.05)。(5)AA大鼠AI、血清TGF01及 IL-6水平、滑膜组织TGFOl的表达水平与LLC均无相 关(P0.05). 结论:(1)血清TGFO1水平与AI呈负相关，血清IL-6 水平与AI呈正相关，推测两者均可作为判断RA活动性 的指标。(2)血清TGF01,IL-6水平变化均先于症状的出 现，推测RA早期体内已经出现了免疫调节紊乱及免疫反 应亢进，在早期检测血