经鼻脑靶向应用源性cgrp对大鼠sah后脑血管痉挛和微循环异常的缓解作用.pdfVIP

l ll l LIll]11II 前言 II11Y1ltllI7507II187 11…… 月U百……………………………………………………………………………一 材料与方法……………………………………………………………………………55 结 果……………………………………………………………………………………………………………60 讨{仑……………………………………………………………………………………………………………62 结 论……………………………………………………………………………………………………………65 附 图……：．．…………………………………………………………………………．66． 参考文献…………………………………………：…．：…………………………一：…．68 致谢：………-………………………………………………………一：……………………………………：……．．70 攻读学位期间发表的学术论文…………………………………………………………．．71 原创性声明…………………………………………………………………………一72 ‘ 。 中文摘要 ’． 目的 ． 1．探讨血红蛋白裂解产物对大鼠基底动脉痉挛和软脑膜微循环的损伤作 用。 2．探讨预防性应用外源性CGRP对蛛网膜下腔出血大鼠脑血管痉挛的保 护作用。 3．探讨经鼻脑靶向中枢应用外源性CGRP对SAH后大鼠脑实质的保护作 用。 ， 4．探讨经鼻脑靶向中枢应用外源性CGRP对SAH后大鼠脑动脉 NO．cGMP系统的影响。 方法 选用健康成年Wistar大鼠，采用枕大池二次注血法建立SAH模型，将 用体视显微镜及活体循环检测系统动态观察活体基底动脉管径及软脑膜微 动脉、微静脉管径；．SAH后3天断头取新鲜脑组织，分离脑底Willis动脉环 及相连脑动脉，制备脑动脉组织匀浆，用RT．PCR法测脑动脉组织内一氧化 oxide 氮合酶(nitric cyclase sGC) mRNA水平的表达，用硝酸酶还原酶法测脑动脉组织内一氧化氮 (nitric oxide，NO)含量，用放射免疫分析法测脑动脉组织内环磷酸鸟苷 (cyclicguanosine 制备脑组织石蜡切片，HE染色，在光学显微镜下观察脑实质内血管形念学 变化，进行微动脉管径测量，Nissl染色，观察海马组织形态学变化。 结果 『F常大鼠基底动脉走行正常，血管内血液充盈，血色鲜红，滴加血红蛋 白裂解产物后，基底动脉痉挛明显，其中10min组痉挛程度最显著，此后管 径逐渐恢复：正常大鼠软脑膜表面微动、静脉呈树枝样分布，动静脉不伴行， 垂直插入脑实质，血管分布均匀，滴加血红蛋白裂解产物后，软脑膜表面微 动脉管径逐渐变小，血管两端粗细不均呈串珠样痉挛，血管内血液呈泥沙样 流动，有些微血管出现微静脉向微动脉逆流的情况，部分血管甚至出现管腔 闭塞，引起血管密度降低，滴加血红蛋白裂解产物后10rain左右最明显，此 后血流逐渐恢复，30min左右逐渐恢复至生理水平，管径不能完全复原，动 物预防性应用外源性CGRP30rain后滴加血红蛋白裂解产物，脑膜表面微动 脉管径狭窄程度轻微，血管内血流较平稳，较少出现串珠样血管痉挛，血管 密度减少程度较用药前轻。Nissl染色示：正常组海马CAI区神经元染色深， 细胞排列紧密有极性，胞浆丰富，富含尼氏体；SAH组海马CAl区神经元 数目减少，细胞排列疏松失去极性，胞浆染色浅，尼氏小体数量减少，SAH+IN CGRP组海马区神经元损伤轻微。H．E染色示SAH组皮层下300la m和500 lam处微动脉管径较正常组痉挛缩小，SAH+INCGRP组管径较J下常小，与