西罗莫司对肾癌786-O细胞株体外培养的生长抑制作用.pfg.pdfVIP

摘要 摘要 目的 细胞株，观察药物对细胞增殖，细胞周期和细胞凋亡，以及MDRl和Survivin mRNA表达方面的影响。 方法 养基于37。C、5％C02、95％饱和湿度条件下的孵箱中培养，每周传代2次；用 不同浓度的Sirolimus处理人肾癌786．O细胞株，同时设对照组。 2．MTT法检测细胞增殖变化。取生长分数约70％．80％的786．O细胞进行 消化，以2000个／孔接种于96孔培养板，放回孵箱培养，24小时后加入不同 48小时，四氮唑盐(噻唑蓝，MTr)还原法检测细胞增殖变化。 3．采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化。细胞经24小时培养 收集细胞总数106个以上，PBS洗涤、重悬后流式细胞仪法检测细胞周期和细 胞凋亡变化。 4．RT-PCR法检测MDRl和SurvivinmRNA的表达。细胞经24小时培养 法检测MDRl和SurvivinmRNA的表达变化。 结果 制作用增强(P0．05)。 亡效应。 3．Sirolimus减少MDRl和SurvivinmRNA的表达(P0．01)；且随药物浓 度的递增，减少表达作用增强(P0．01)。 摘要 结论 滞效应，无诱导细胞凋亡作用；能下调MDRl和SurvivinmRNA的表达。 Survivin 关键词：西罗莫司 肾细胞癌786．O细胞MDRl P．糖蛋白 II Abstract ABSTRACT objectives Inthis effectsofsirolimusonrenalcellcarcinoma paper,thegrowthinhibiting 786．Ocellsinvitrowerestudied． Methods 1．HumanRCC786一OcellswereculturedinRPMI1640medium supplemented a air with10％fetalbovine at37℃in serum，and 5％COz／95％humidified were three subcultured atmosphere．Cells every days． 2．MTT usedtoassessthe effectson786-Ocells． was assay anti—proliferation Cellswereharvestedwhen reached70％to in96一well grew 80％confluence，plated for incubatedat37。Cina air plate2000cells／well，and 5％COJ95％humidified concentrationofsirolimuswereadded48hours tocell atmosphere．Different prior harvest． 3．Flow wasusedforcell