原发性肝细胞癌ing1基因表达的研究.pdf

中文摘要 中文摘要 目的：构建矾G1b表达质粒。检测原发性肝细胞癌标本及配对的非肿瘤组织中 玳G1基因总体表达水平以及INGl基因主要转录本转录水平的变化，初探玳G1 基因不同转录本在肝细胞癌进展中的意义。 胞，于48小时后提取细胞总蛋白，用westem印迹证实其表达。以该蛋白样品 作为后续wjstem印迹实验的阳性对照。3、用westem印迹方法检测多个肿瘤细 胞系及有代表性的肝组织标本中矾G1基因不同转录产物的表达谱。4、用免疫 组织化学方法及半定量RT-PcR方法，分别检测31对肝细胞癌标本及配对的非 肿瘤组织中mGl基因总体表达水平以及NGl基因两种主要转录本的转录水平。 结果： 1．成功构建了p33矾G1b．v5融合蛋白表达质粒。 p33矾G1b。 3．在肝细胞癌标本及非肿瘤组织中INGla、玳G1b为该基因的主要转录本。 4．在低分化肿瘤病例组及TNMⅢA—IIIB期病例组内，肿瘤组织中玳G1基 因总体表达水平高于配对的非肿瘤组织(p0．01)，肿瘤组织中玳G1b转录水平 明显高于配对的非肿瘤组织(po．01)。而在高分化肿瘤病例组及临床分期较早 的皿卟tI．1I期病例组内，肿瘤组织与配对的非肿瘤组织间矾G1基因总体表达 水平以及ⅣG1b转录水平无明显差异(p0．05)。在肿瘤组织与配对的非肿瘤组 织间玳G1a转录水平无明显差异(DO．05) 5．肿瘤组织矾G1基因总体表达水平的上调与肿瘤大血管浸润、肿瘤TNM 转录水平的上调与肿瘤TNM分期呈正相关(pO．05)，与肿瘤分化水平呈负相关 (p0．05)。 结论：D33矾G16的表达上调与原发性肝细胞癌的进展密切相关。 关键字：原发性肝细胞癌INGl剪接模式R}PcR免疫组织化学 Abs仃act Abstl·act VectoLTo tllerelatiVe 0bjective：To∞nstmct玳G1bstudy expression exprcssiIIg levelof玳G1 andrelative levelof烈G1aor烈G1bbe晰een gcne tfanscription non-tumorliVcr andmatched tissue，andinvestigate prinl缸yh印atocellul盯carcinoma jn di疵rcnt00n渤utjonsofINGl isofo肋s of gcne progressionprim盯y carciIloma． hepatoccllular doned of烈G1bintO M岫ods：Wbcodingsequence pUB6A ill 48 transfcctionHela collectedtotalceU after cells，锄d lysespmtein hours，ttlen checked of V5 Westem fIlsi∞proteinby b10tting．111isprotein exprcssionp33矾G16 was inthe asa c