拉莫三嗪、脑力对癫痫大鼠空间学习的影响及海马神经元nnos表达的变化.pdfVIP

中文摘要 拉莫三嗪、脑力隆对癫痫大鼠空间学习的影响及 海马神经元nNOS表达的变化 摘 要 发作性疾病之一。是由各种原因引起的脑功能障碍综合征， 是脑细胞群异常超同步化放电而引起的发作性的、突然的、 暂时的脑功能紊乱。癫痫最显著的临床特征是长期反复的不 同形式的痫性发作和脑电图的痫性改变。在临床中，抗癫痫 药物(anti印il印ticdrugs，AEDs)是癫痫治疗的主要手段，有一 部分癫痫患者需要长期甚至终生服用抗癫痫药物。很多癫痫 患者常伴有学习记忆减退，有研究表明30％．40％的癫痫患者 存在认知功能障碍。影响癫痫患者生存质量的因素除痫性发 作的类型、频率、发病年龄之外，抗癫痫药物的使用也是一 个重要因素。一氧化氮(nitricoxide，NO)是一种新的细胞间信 息交换载体，是中枢神经系统细胞间信使分子，具有第一信 使和神经递质功能。NO对神经元具有保护和损伤的双重作 用，生理剂量的NO对神经系统的活动是至关重要的，但过 量的NO对神经系统又会产生明显的毒性作用。NO广泛参 与机体的多种生理和病理作用，它在癫痫及学习记忆中均起 有重要作用。在中枢神经系统中，神经元型一氧化氮合酶 nitricoxide (neuronal 酶，nNOS主要存在于神经元中，在多数情况下低水平表达， 机体一旦受到病理性刺激，nNOS即大量表达，生成大量NO 产生毒性作用。迄今为止，nNOS与癫痫后及服用AEDs后 中文摘要 认知功能损伤关系的研究甚少。本实验利用戊四氮 组，并分别给于脑力隆和拉莫三嗪灌胃处理，通过脑电图 water mflze test，MWMT)，探讨两种药物对痫性发作的控制情况和 对癫痫大鼠学习记忆能力的影响：用免疫组织化学染色技 术，观察nNOS在海马神经元中表达的变化情况，为进一步 研究抗癫痫药物对癫痫患者认知功能影响的机制提供依据。 方法 l造模 4-209。经过Moms水迷宫试验筛选，合格者进行模型制备。 筛选后获得合格动物57只，按照随机分组的方法将大鼠分 组n=lO)。造模过程中大鼠出现死亡或不符合模型要求者， 予以剔除并随机补充，以保证每组动物10只。 1．1慢性癫痫动物模型的建立 实验组大鼠每日腹腔注射I％PTZ 35mg／kg一次，对照 组每日腹腔注射等量的NS。大约15天后，依据Racine分级 标准对动物逐个进行观察记录，凡己获得连续3次II级或III 级以上发作者，被认为完全点燃。 1．2灌胃处理 动物完全点燃后，进行灌胃处理。A组、B组、E组大 鼠分别灌NSlml／次，C组灌脑力隆1／4粒／次，D组灌LTG 中文摘要 20mg／kg／次。每日灌胃两次，大约灌胃20日左右。 2脑电图 动物完全点然后，每组随机选取大鼠2．3只，麻醉后固 定于脑立体定向仪上，放置额叶皮质和颞叶皮质电极，待大 鼠清醒后，腹腔注射PTZ致大鼠痫性发作，并描记脑电图， 验证点燃效果。 3认知功能检测 造模成功后，通过Morris水迷宫试验检测A，B，C，D组 大鼠的认知功能，以寻找平台潜伏期(Searchingplatform time)和逗留 platform latency,SPL)、寻找平台时间(Searching time)作为大鼠的学习记忆成绩。 平台象限时间(Stay 4免疫组织化学染色 麻醉状态下经左心室行主动脉插管，4％多聚甲醛溶液进 行灌注，取脑固定，常规包埋，标本冠状位石蜡切片。经抗 原修复、羊血清封闭后，加nNOS多克隆抗体，在经二抗、 三抗孵育，DAB显色后置显微镜下观察记录。 结果 l癫痫行为学 各实验组大鼠均出现了不同程