替米沙坦对骨桥白在单侧输尿管结扎大鼠肾组织中表达的影响.pdfVIP

中文摘要 替米沙坦对骨桥蛋白在单侧输尿管结扎 大鼠肾组织中表达的影响 摘 要 interstitinal 目的：肾间质纤维化(Renal fibrosis， RIF)是多种。肾脏疾病进展的共同结局。研究发现在慢性肾 脏疾病中肾小球滤过率减少与肾间质纤维化密切相关，在慢 性肾脏病的进展过程中肾间质纤维化扮演着极为重要的角 色。 ． 肾小管间质损害的特征是炎细胞浸润，而促进炎细胞的 浸润的细胞因子尚未完全明了。巨噬细胞是炎症细胞，它的 聚集程度与随后相应部位的纤维化程度密切相关，是启动肾 间质纤维化病变的重要始动环节，而骨桥蛋白(OPN)是吸引 。肾间质巨噬细胞最重要的趋化因子，其表达量与间质炎症和 纤维化程度密切相关。OPN不但趋化循环中的单核巨噬细胞 到肾小管间质，而且直接刺激肾固有细胞如’肾小管上皮细 胞，启动或扩大炎症反应，而炎症反应可导致肾小管变性损 伤，继而肾间质成纤维细胞活化、肾小管萎缩消失。研究发 现在肾小管最初受损时，OPN还可促进肾小管上皮细胞再生 和重建，帮助其功能的恢复，但随着病情的发展，病变逐渐 严重，这种作用失代偿。由此可推断通过局部阻断OPN因子， 抑制单核巨噬细胞在‘肾间质的聚集与增殖，可达到减轻炎症 反应，减轻肾小管损伤、抑制纤维化的目的。 替米沙坦是一种新型血管紧张素IIl型受体(AT．R)拮抗 剂，在肾脏疾病治疗中具有降低血压、减少蛋白尿、保护。肾 中文摘要 功能的作用。目前尚未检索到替米沙坦对于OPN的调节作 用。本课题拟通过输尿管结扎建立大鼠肾间质纤维化动物模 型，研究OPN及增殖细胞核抗原(PCNA)在肾间质纤维化时的 表达，从细胞因子水平探讨替米沙坦减轻肾间质巨噬细胞的 浸润及间质纤维化。探讨替米沙坦抗间质纤维化，延缓。肾脏 病变进展，保护肾功能的机制。 方法：选择清洁级健康雄性SD大鼠72只，体重(210 ±10)克，随机分为三组：假手术组(A组n=24)，输尿管结 扎组(B组n=24)，替米沙坦(美卡素勃林格殷格翰 大鼠以水合氯醛(0．1ml／kg)腹腔注射麻醉后，行左侧耻骨上 切口，沿左。肾下极寻找到左侧输尿管，在中上1／3处用4 号线上下结扎两处，然后从中剪断输尿管，以防逆行性感染， A组除不结扎和剪断输尿管外，其他手术过程同前。术后各 组大鼠均正常饮食。A组和B组大鼠用生理盐水2ml灌胃， 1次／曰；C组大鼠以美卡素混悬液27mg／kg／d灌胃，1次／ 日。三组均于术前一天开始灌胃至术后第l、4、7、14d每 组大鼠各取6只处死，快速取出左肾，按冠状位纵形切开， 取肾组织的1／2置于10％福尔马林固定液固定，酒精逐级 脱水，二甲苯透明石蜡包埋，制成5um切片。在第14天处 死大鼠时收集3ml血标本及处死前24h尿液．24h尿送检尿 肌酐、尿蛋白，血标本送检肌酐．光镜HE染色观察肾脏病 理变化。采用免疫组织化学染色测定肾间质OPN、肾小管上 皮细胞PCNA的表达及肾间质单核巨噬细胞数的变化，结果 应用图像分析系统进行半定量分析。实验结果均以均数±标 准差(；±S)表示，各组间比较采用单因素方差分析，相关 中文摘要 分析采用直线相关分析，应用SAS统计分析软件对实验数据 进行统计学处理，PO．05为有统计学意义。 结果：各组大鼠生化检查结果，与A组相比，B组及C 组大鼠肌酐清除率(CCR)、24h尿蛋白定量均无明显变化。 光镜下观察，HE染色A组未见异常。HE染色可见B组及C 组各时相点大鼠肾脏肾小球均无明显变化。B组术后3天肾 小管扩张不明显，可见肾间质炎症细胞局灶浸润，肾间质宽 度增加；第7天肾小管扩张明显，上皮细胞变性、水肿、甚 至坏死，肾间质大量炎症细胞浸润，间质宽度明显增加，偶 见萎缩肾小管；第14天上述病变加重，可见弥漫的肾小管 基底膜增厚皱缩，小管基底膜不同程度断裂，皮质及外髓萎 缩的肾小管较多，问质中大量淋巴单核细胞浸润，纤维化较 明显。免疫