局部亚低温激活粒体atp敏感性钾通道对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用.pdfVIP

中文摘要 局部亚低温激活线粒体ATP敏感性钾通道对大鼠全 脑缺血／再灌注损伤的保护作用 摘 要 目的：观察局部亚低温对大鼠全脑缺血／再灌注损伤的 保护作用，探讨局部亚低温激活线粒体ATP敏感性钾通道 及其脑保护的可能机制。 方法 1实验分组及动物模型制备 2509(河北医科大学实验动物中心提供)。随机分为4组 (n=8)：假手术组(S组)：暴露双侧颈总动脉和基底动脉， 基底动脉仅穿线不阻断，维持正常体温(36．5～37．5C)， 观察12小时；缺血／再灌注组(I／R组)：暴露双侧颈总动 脉和基底动脉，双侧颈总动脉动脉夹夹闭，基底动脉穿线并 阻断，缺血10 rain，再灌12小时，维持正常体温(36．5～ 37．5C)；亚低温组(H组)：暴露双侧颈总动脉和基底动脉， 双侧颈总动脉动脉夹夹闭，基底动脉穿线并阻断，缺血10 ml10 min，再灌12小时，再灌注前即刻经股静脉输注3．5 ℃生理盐水，结合冰袋冷敷头部，采用60W白炽灯泡距 离大鼠37啪高度直接照射身体，通过调节灯至身体的距 离及头部冰块的数量来调节，使鼓膜温度在1rain内降至 32～34℃，肛温在20rain内恢复并维持于正常体温(36．5～ 37．5。C)，头部低温维持3小时，自然复温；5一羟基葵酸钠 组(5．HD组)：缺血前30rain，腹腔注射1 mg／nll的5一 中文摘要 羟基葵酸钠10mg／kg，余处理同H组。其它三组于缺血 前30min，腹腔内注射等容积生理盐水。 全脑缺血／再灌注模型制备：采用三血管阻断法。 2检测指标及检测方法 2．1．1各组动物体重，月龄。 ． 2．1．2各组动物脑缺血前5 min口1)、脑缺血10min(蚴、 rain 再灌注后10 03)分别采集股动脉血监测血气指标。 2．2神经行为学评分 再灌注12小时分别进行神经行为学评估。格子爬行实 rain 验(OFT)：将动物置于分析箱的正中方格中，观察5 Ill 内动物的跨格次数(三爪以上跨入邻格)，分析箱大小为l ×1mX0．4 cmX20 m，箱底分为25个方格(20 cm)。斜 板实验(胛)：将大鼠按头向下的方向置于45度倾斜的木 板上，记录大鼠本能的转体为头向上所需的时间。 2．3脑组织匀浆超氧化歧化酶(SOD)活性 缺血／再灌注12小时，水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，断头 处死大鼠。在冰盘上迅速取出右侧大脑半球，置于--20℃冰 箱保存备用。采用黄嘌呤氧化酶法测定脑组织匀浆SOD活 性。 2．4脑组织匀浆丙二醛(MDA)浓度 缺血／再灌注12小时，水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，断 头处死大鼠。在冰皿上迅速取出右侧大脑半球，置于--20 ℃冰箱保存备用。采用硫代巴比妥酸法测定脑组织匀浆 MDA浓度。 2．5脑水含量 缺血／再灌注12小时，水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，断 中文摘要 头处死大鼠后，在冰盘上迅速取出脑组织取左侧大脑半球， 滤纸吸干表面水份，置于干燥小瓶中-20C保存。用干(110 ℃，24小时烘干)、湿重法计算脑水含量，作为脑水肿程度 的判断标准。 2．6血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)的浓度 缺血／再灌注12小时，水合氯醛腹腔注射，麻醉后取颈