阿维A酸和沙利度胺对小鼠黑素瘤细胞株B16增殖和VEGF表达的影响.pdfVIP

中文摘要 阿维A酸和沙利度胺对小鼠黑素瘤细胞株B16 增殖和VEGF表达的影响 摘 要 目的：恶性黑素瘤主要发生于皮肤，极易发生转移和引 起患者死亡。随着肿瘤基础研究的不断深入，目前对黑素瘤 的综合治疗措施(如手术、放化疗、免疫治疗等)日趋完善， 但仍有部分患者难以取得令人满意的疗效。为筛选有效的黑 素瘤化疗药物，本文探讨阿维A酸和沙利度胺对小鼠黑素瘤 细胞株B16增殖的抑制作用及机制，为两药拟在临床中的应 ’ 用提供基础实验依据。 方法：以体外培养的小鼠黑素瘤细胞株B16为研究对象， 用不同浓度的阿维A酸和沙利度胺处理B16细胞。 1采用四甲基偶氮唑蓝(MTr)比色法，检测两药在不同 时间对B16细胞增殖的抑制作用。 2倒置显微镜和HE染色法观察B16细胞形态的变化。 3采用流式细胞分析术，检测细胞周期变化和凋亡的 发生。 4应用免疫细胞化学s-p法，检测血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。 5流式细胞术检测B16细胞VEGF蛋白的表达。 6运用统计软件SPSSl2．0对数据进行统计分析。 结果：1 MTr法显示，阿维A酸和沙利度胺对B16细 胞增殖有抑制效应：阿维A酸对B16细胞增殖有明显的抑制 中文摘要 浓度的阿维A酸处理B16细胞24h后，由低浓度到高浓度的 在同一药物浓度条件下，阿维A酸对B16细胞增殖的抑制作 用随时间的延长而增强。终浓度为100／zmol／L的阿维A酸作 用72小时后，对B16细胞的抑制率最高，为71．83％，在 殖的抑制率随浓度增高而增加；沙利度胺对B16细胞有轻度 度的沙利度胺处理B16细胞24h后，由低浓度到高浓度的沙 利度胺对B16细胞增殖的抑制率分别为4．86％、8．67％、 10．42％、9．64％，处理48h后，以上四个浓度的沙利度胺对 在同一药物浓度条件下，沙利度胺对B16细胞增殖的抑制作 用随时间的延长而增强。100弘g／ml沙利度胺作用72小时后， 的抑制率比100,ag／ml沙利度胺组低，沙利度胺在 浓度增高和时间延长而增加。 2经阿维A酸和沙利度胺处理24小时后，倒置显微镜 下即可见到B16细胞变圆，不贴壁，细胞折光性减弱或消失， 2 中文摘要 对照组细胞贴壁生长良好，细胞呈梭形，透明，折光性好， 细胞增生活跃。HE染色观察到阿维A酸组细胞呈团块状生 长，沙利度胺组细胞与对照组相比，未见明显变化。 3流式细胞检测显示，不同浓度的阿维A酸和沙利度 比例减少(P0．01)；实验组与对照组均未检测到细胞凋亡。 5流式细胞术检测结果显示，10#mol／L阿维A酸作用 72小时后，与对照组相比，表达VEGF的阳性细胞数下降 利度胺作用72小时后，与对照组相比，表达VEGF的阳性 细胞数下降佃0．01)，VEGF的平均荧光强度无明显变化 @0．05)。 结论：1阿维A酸和沙利度胺能抑制B16细胞增殖， 并且在～定浓度和时间范围内，二者对B16细胞增殖的抑制 具有量效相关性和时间依赖性。 ． 2四个浓度的阿维A酸和loom,／ml沙利度胺均能抑制 的作用尚不明显。 作用较弱。 4 B16细胞对阿维A酸的敏感性远大于沙利度胺。 因此，我们认为阿维A酸对小鼠黑素瘤细胞株B16增 殖和转移的抑制作用优于沙利度胺，但若二者联合应用可增 中文摘要 4 英文摘要 andthalidomideon The effectofacitretin inhibitory of in andthe