树突状细胞瘤苗肿瘤功能的实验研究.pdfVIP

中文摘要 树突状细胞瘤苗抗肿瘤功能的实验研究 摘 要 目的：口腔颌面部肿瘤是头颈部肿瘤的重要组成部分。 在我国80％以上的口腔颌面部恶性肿瘤是鳞状细胞癌(简 称鳞癌)，采用手术、放疗、化疗等传统的方法仍难根治， 复发率高，而且位于重要部位的肿瘤不适合切除，预后差， 为改善治疗效果，人们进行了许多有益的探索，尝试了一些 新的方法，以期获得更佳的效果。如果能采用生物治疗的方 法，控制早期癌变的发展，延长晚期癌病患者的生存质量并 延长生存时间，尽量减少手术切除组织的范同，对于口腔癌 患者来说不啻为一种福音。作为已知的人体内抗原呈递功能 最强的专职抗原呈递细胞——树突细胞，现已具备了进行体 外分离、扩增、与培养的成熟技术，各种形式的DC肿瘤疫 苗的研究已成为当前肿瘤治疗的一大热点。近年来，随着 DC的功能和生物学特性被不断认识，DC在肿瘤免疫、移 植免疫和抗感染免疫等方面日益受到人们的重视，被运用于 B细胞淋巴瘤、黑色素瘤、前列腺癌、转移性’肾癌和多发性 骨髓瘤等恶性肿瘤的临床尝试性治疗，并取得了令人鼓舞的 疗效。在众多的DC瘤苗方案中，肿瘤细胞与DC融合得到 细胞融合疫苗以及基于树突状细胞fdendritic cells，DC)的疫 苗方案由于其明确的治疗效果而受到广泛重视。本实验采用 重组人粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子(GM．CSF)，重组人 中文摘要 养健康人外周血单核细胞获得成熟DC，以Tca8113人舌黏 膜鳞状细胞癌细胞冻融抗原致敏DC制备瘤苗。观察其对荷 瘤裸鼠的抑瘤作用，来探讨树突状细胞疫苗用于口腔鳞癌患 者免疫治疗的可行性。 方法：取健康志愿者抗凝外周血20ml，常规分离外周 blood 血单核细胞(peripheral 7个 胎牛血清的RPMll640培养液调整细胞浓度为1×10 ／ml，然后接种于6孔板，每孔3ml。5％CO：，37℃条件下孵 育2～3h后，吸出培养上清，用预热的培养基清洗板1次， 以去除非贴壁细胞(冻存)，获得贴壁的单核细胞，用重组 人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(rhGM．CSF)、重组人白细 导人外周血单核细胞成为成熟DC。Tca83舌癌细胞可溶性 抗原体外致敏DC，将同源人T淋巴细胞与之共同培养诱导 出抗原特异性的细胞毒性T淋巴细胞fCn．s)，共同接种至荷 瘤裸鼠体内行免疫治疗。 结果：人外周血单核细胞在细胞因子协同诱导下可获得 功能正常的DC，用致敏DC+CTLs免疫治疗的荷瘤裸鼠与对 照组相比，实验组肿瘤生长速度减慢，实验结束时(第21 天)肿瘤体积明显小于对照组，明显抑制肿瘤生长(P0．05)。 绘制两组裸鼠肿瘤生长曲线，对照组肿瘤生长曲线较陡，上 升幅度较大，实验组肿瘤生长曲线呈缓慢下降趋势。实验结 束时实验组的抑瘤率为26．16％，与对照组行配对t检验， 差异有统计学意义(P0．05)。 结论：采用舌鳞癌肿瘤细胞冻融抗原体外致敏DC，诱 导产生肿瘤抗原特异性CTLs具有显著的抑瘤效应，实验证 中文摘要 明，DC瘤苗治疗舌鳞状细胞癌是可行的，有望成为口腔肿瘤 免疫治疗的新途径。 关键词：舌鳞状细胞癌；树突状细胞；免疫疗法；重组人 粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子；重组人白细胞介素．4；肿 瘤坏死因子．a 薹查塑墨 dendriticcellvaccine effect A of Inhibitory Study onthe of cell squamous