TGF-β1、MP-9基因多态性与慢性乙肝易感性的相关研究.pdfVIP

中文摘要 TGF一13 1、MMP-9基因多态性与慢性乙肝易感性的相 关研究 摘 要 目的：乙型肝炎是威胁人类健康的一种重要疾病，乙肝 病毒(HBV)的感染在世界范围内很广泛。目前我国乙型肝 炎的发病率居传染病首位，死亡数居传染病第三位，危害很 严重。不同个体在感染HBV后临床表现及结局各不相同。 近来的研究显示乙肝感染具有遗传易感特征，HBV感染的预 后与个体基因的多态性有关。单核苷酸多态性(single nucleotide 标记，正逐步成为分子诊断、临床检验、新药研发的重要手 段。通过检测基因的SNPs发现新的基因突变情况及基因多 态性与人类疾病的相关性，能为进一步了解疾病发生发展的 分子机理提供依据。因此，系统地研究个体基因的多态性与 慢性乙型肝炎的相关性，对于慢性乙型肝炎的预测、预防及治 疗将会起到重要作用。TGF。B基因和MMP基因是目前研究 的热点。本课题通过检测慢性乙型肝炎患者和正常人群中 TGF．B1基因启动子区．509C／T基因多态性和MMP．9启动子 区．1562C／T基因多态性的分布频率，分析此两个功能性基因 多态性与慢性乙型肝炎的相关性，探讨它们在慢性乙型肝炎 发生和发展中所起的作用，以便从更深入的基因水平寻找慢 性乙型肝炎的遗传根源，为其预防和治疗提供相应的指导， 最大限度地预防这些疾病的发生和发展。 方法：按照2000年全国第十次病毒性肝炎及肝病学术 中文摘要 会议修订的《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准，选取河北省 石家庄市传染病医院的慢性乙肝患者75例作为病例组(包括 48例慢性肝炎患者和27例肝炎后肝硬化患者)、92名健康体 检人员作为正常对照组；取研究对象外周静脉血5ml，用胍 盐酸法提取血细胞中的人类基因组DNA，并用紫外分光光度 计检测DNA的浓度和纯度。 l 应用等位基因特异扩增方法(ASA)设计两对TGF—13 基因启动子区．509C／T位点的特异引物(分别扩增野生型等 位基因和突变型等位基因)，模板DNA经PCR扩增后，扩 增产物经l％琼脂糖凝胶电泳分离，对个体基因型及等位基因 型进行判定。在基因分型时做空白对照进行PCR质苣控制； 随机抽取lO％样本，重复检测其基因多态性。 I酶切，酶切产物 经PCR扩增后，得到的PCR产物用Sph 经1．25％琼脂糖凝胶电泳分离，检测个体基因型及等位基因 型。 应用SASV8．1软件进行统计学处理：计量资料用均数± 标准差(x±SD)表示；基因频率采用基因计数法计算，组问 基因型及等位基因频率的比较采用卡方检验，P0．05为差异 有统计学意义。 结果：病例组与对照组在年龄、性别等基本特征比较无 显著性差异(P0．05)，两组具有较好的可比性。研究结果显示 TGF．B 1基因启动子区一509位点出现C／T变异，健康对照 l一509 组、病例组都以CT基因型为主，两组比较，TGF．B 位点各基因型和等位基因的分布频率并无显著性差异 中文摘要 基因型频率(18．52％)，肝炎后肝硬化组CC基因型频率 l一509 性肝炎组慢轻肝、慢中肝、慢重肝三组比较TGF．13 位点各基因型和等位基因的分布频率无显著性差异 fP0．05)。肝炎后肝硬化组活动性肝硬化和静止性肝硬化两 组比较TGF—B1—509位点各基因型和等位基因的分布频率 无显著性差异(PO．os)。 研究结果显示MMP．9基因启动子区一1562位点出现 C／T变异，本研究只检测到CC基因型和CT基因型。病例组 与健康对照组比较，MMP．9一1562位点各基因型和等位基因 的分布频率没有显著性差异fP0．05)。慢性肝炎组与肝炎