人支气管上皮细5—脂氧合酶的表达与联苯胺的活化及细胞毒性.pdfVIP

摘要 [目的] 结合能肯定LOX介导联苯胺氧化反应的体外酶系统实 验与联苯胺对HBE细胞5一LOX蛋白表达和细胞DNA损伤的影响的细 胞实验研究。初步探讨细胞内5一LOX对外源化合物的代谢情况，试 图为LOX作为细胞色素P450氧化代谢外源化合物的替代途径提供进 一步的依据。 [方法]体外酶系统实验：在适宜条件下，大豆脂氧合酶(SLO) 与联苯胺(BZ)等在酶体系中开始反应后，用分光光度法在特定波长 检测反应体系中反应产物及自由基中间产物的生成情况，计算SLO对 联苯胺氧化代谢速率和EGCG对代谢的抑制率。 细胞实验：分别以不同浓度的联苯胺染毒HBE细胞24小时，然 单细胞凝胶电泳实验检测各组的DNA损伤情况。最后检测特异性5一 LOX抑制剂(AA861)对5一L0x蛋白表达和对DNA损伤的影响。 [结果]在过氧化氢参与下，SLO可以协同氧化联苯胺，氧化后 酮类化合物EGCG可抑制该协同氧化作用，且在一定范围内呈剂量效 应关系。联苯胺可以使HBE细胞内5一L0x蛋白表达增加，hA861对5 --LOX蛋白表达没有影响；联苯胺可以使HBE产生明显的DNA损伤， AA861可以明显抑制DNA损伤情况。 [结论]在过氧化氢参与下，SLO可以介导联苯胺协同氧化，EGC6 可以抑制该协同氧化作用。5一LOX在HBE细胞内的蛋白表达是可以 经联苯胺调节的，特异性5一LOx抑制剂AA861对其蛋白表达无明显 影响。HBE细胞内的5一LOX可能通过介导联苯胺协同氧化，产生亲 抑制该反应。 关键词5一脂氧合酶，协同氧化作用，联苯胺，蛋白表达，DNA 损伤 ABSTRACT effect 【Objectives】Theenzymicofintracellular on 5-1ipoxygenase co。oxidationofbenzidine andeffectsofbenzidineto 5-1ipoxygenase protein andDNA werebeen inHBE expressiondamage investigatedcells， withthe thatCanaffirm theco-oxidationof study benzidinemediated by SLOinthe to fllrther that enzymicsystem，inorder provide proof the is alternativeforthe lipoxygenase pathwayoxidationofxenobiotics mediated P450． bycytochrome 【Methods】Enzymicvitrosuitablereaction experiment：In conditions soybcan other reactinthe followed the component enzymicsystem，and bydetecting reaction andfreer