哺乳期低剂量暴2，3，7，8-四氯二苯-对-二噁英对仔鼠免疫器官CYP1A1表达和凋亡的影响.pdf

中文摘要 哺乳期低剂量暴露2，3，7，8一四氯二苯一对一二嗯 英对仔鼠免疫器官CYPlAl表达和凋亡的影响 摘 要 目的： 二嗯英类化学物质是多氯代二苯并二嗯英(PCDDs)、 称，其中以2，3，7，8．四氯代二苯并一对一二嗯英(2，3，7， 结构稳定，通过食物链进入人体后，在动物和人的脂肪中蓄 积，对人体健康构成严重威胁，因而被世界卫生组织(World Health 境监测计划食品部分的监测对象名单。 由于有关哺乳期暴露于TCDD对子代影响的研究还不多 见，所以本研究在雌性小鼠分娩后立即经腹腔注射低剂量 TCDD，通过乳汁对仔鼠染毒，然后观察哺乳期暴露于TCDD 对仔鼠体重增长、胸腺和脾脏发育的影响，胸腺和脾脏组织 1 P450 结构以及细胞色素P450 1A1， A1酶(cytochrome CYPlAl)、凋亡基因Bcl．2(B．Cell 2)和 lymphoma／leukemia x Bax(Bcl．associated protein)蛋白表达的变化，为低剂量 TCDD造成的子代慢性免疫器官危害及其机制提供科学依 据。 方法： 1 实验动物 4月龄健康成年昆明小鼠，雌鼠24只，雄鼠8只，按照 中文摘要 3：1的雌雄比例同笼受孕。分娩7—10只仔鼠的整窝保留，调 整每窝仔鼠为8只，雌雄对半，其余淘汰。 2试剂 腔注射前将该试剂用花生油稀释，体积比为TCDD：花生油= 1：4，则浓度稀释为21．tg／ml。溶剂对照为甲苯和花生油按1：4 体积比混合的混合液。 3分组 将母鼠和仔鼠作为整体(窝)进行完全随机分为5组(每 组3窝)：401．tg和20pg 剂／l【g体重对照组，1个不做任何处理的空白对照组。5个实 验组以下简写为40pgTCDD组、20pgTCDD组、401．tg溶剂 对照组、2099溶剂对照组和空白对照组。雌鼠分娩后，立即 称重并腹腔注射。经母鼠哺乳染毒至仔鼠出生后第21天， 随后仔鼠自由进食。仔鼠出生后第35天被处死。 4仔鼠体重的测定 5仔鼠免疫器官发育指标(胸腺重量、胸腺指数、脾脏重 量、脾脏指数)的测定 6仔鼠胸腺和脾脏组织CYPlAl蛋白定位和半定量分析 7仔鼠胸腺和脾脏组织细胞凋亡的测定 7．1 采用H．E染色法观察仔鼠胸腺和脾脏组织的结构变化。 7．2 采用免疫组织化学染色法对仔鼠胸腺和脾脏组织 Bcl．2和Bax凋亡蛋白进行定位和半定量分析。 结果： 1 TCDD对仔鼠体重的影响 新生仔鼠体重无显著性差异(P0．05)；出生后第7天开 中文摘要 TCDD组仔鼠的平均体重低于其溶剂对照组和空白 始，20pg TCDD组仔鼠的平均体重均低于相应的溶剂对照组和空白对 TCDD组仔鼠的平均体重低于 照组(P0．05)，并且401．tg 2099 35天)，暴露于TCDD仔鼠的平均体重依然低于相应的溶剂 对照组和空白对照组(P0．05)。 2 TCDD对仔鼠免疫器官重量的影响 2．1 TCDD对仔鼠胸腺重量的影响 TCDD组胸腺重量与相 雄性和雌性仔鼠的4099和20pg 应的对照组之间均不具有显著性差异；雄性40pg和201．tg 性之间无统计学差异。 2．2 TCDD对仔鼠脾脏重量的影响 TCDD组的脾脏重量与 雄性和雌性仔鼠的4099和201-tg