动物肝脏中黄曲毒素及其加合物的LCMSMS分析方法研究.pdf

摘要 摘要 动物肝脏含有丰富的营养物质，经烹饪加工后具有独特的口感，因而成为 大众喜爱的佳肴。然而，黄曲霉毒素的产毒菌株在自然界中的分布极其广泛， 尤其在我国广大南方地区，高温潮湿的气候给菌体繁殖和毒素产生提供了更加 有利的条件，每年有大量农产品、饲料受到黄曲霉毒素的污染，动物食用了被 污染的饲料后，黄曲霉毒素就在其体内蓄积，尤其是在肝脏部位形成了AFBl与 DNA或蛋白质的加合物。目前对黄曲霉毒素的分析主要集中于游离态，对其加 合物的检测方法很少，因此本课题在建立LC／MS／MS法检测黄曲霉毒素的基础 上，通过酸解、酶解等方法将黄曲霉毒素从加合物中游离出来，再检测其含量。 本文主要分为三部分： 第一章：介绍了黄曲霉毒素的研究历史、理化性质、结构，对人畜的危害、 各国的限量标准，阐述了黄曲霉毒素的检测方法，概述了黄曲霉毒素加合物及 其分析方法研究现状。 第二章：建立了动物肝脏中黄曲霉毒素G2、Gl、B2、Bl的快速液相色谱串 联质谱检测方法，样品经体积比为84／16的乙腈水溶液提取，离心后上清液移入 250mL分液漏斗中，加20mL正己烷脱脂，收集下层清液，取清液通过真菌毒 mmol／L 素多功能净化柱，净化液氮气吹干，用流动相定容，采用C18柱分离，10 的甲酸铵溶液和甲醇作为流动相，以50：50比例等度洗脱，在多重反应监测 (MRM)正离子模式下进行分析。各组分在9rain内完全分离，方法线性关系 pg／l【g，三个加标水平下平均回收率在81％98％之间，相对标准偏差小于5％。 该方法简便快速，准确可靠，可用于动物肝脏中黄曲霉毒素的测定。 第三章：分别采用酸解、酶解两种方法对黄曲霉毒素加合物进行分解，通 过单因素实验，考察了pH、温度、时间、加酶量对分解效果的影响，对加合物 分解的可行性进行了初探。 摘要 关键词：黄曲霉毒素；动物肝脏；加合物；液相色谱串联质谱；分解 ABSTRACT ABSTRACT its Animallivercontainsrich became because nutrients，it populardelicacy tasteafter strain distributeinthe unique cooking．However,aflatoxintoxigenicwidely hotand climate natural inthevastsouthareaof humid world，especially China,the morefavorableconditionsforthethallus andtoxins provide propagationproduction． of andfeedarecontaminated a number agricultural by Everyyearlarge products accumulateinanimal when foodthose aflatoxin．Aflatoxins body they