大豆异黄酮对成细胞效应的体外研究.pdfVIP

，：且大掌硕士掣啦论文 中文摘要 大豆异黄酮对成骨细胞效应的体外研究 中文摘要 目的 随着人类社会的老龄化，骨质疏松症的发病率逐渐增高，已经成为老 龄化社会的高发生率疾病。骨质疏松症发生的影响因素有很多，90年代以来膳 食因素特别是膳食中的大豆异黄酮对骨质疏松发病的影响越来越受到关注。研究 表明大豆异黄酮可以促进体外培养的成骨细胞的增殖和胶原蛋白的合成，抑制破 骨细胞的增殖，但是大豆异黄酮的作用机理目前仍不清楚。大豆异黄酮对去卵巢 骨质疏松模型大鼠有明显的骨保护作用，人群流行病学研究尚不能确定大豆异黄 酮对骨质疏松的发病是否有保护作用。本文拟通过体外细胞培养的方法研究两类 主要的大豆异黄酮(大豆苷原和染料木黄酮)对大鼠成骨细胞功能的影响以及可 能的机制。 方法从新生SD大鼠头颅骨中分离成骨细胞，取第二继代成骨细胞分6组， 分别加入不同浓度的大豆苷原和染料木黄酮，以雌二醇(E9为对照，并观察雌激 素受体拮抗剂ICI 182780对大豆异黄酮作用的影响。成骨细胞在大豆异黄酮作用 下培养48小时或96小时后，MTT法测定细胞增殖率，PNPP法测定成骨细胞内 碱性磷酸酶(AKP)活性。留取第7天和第12天的培养液，放免法测定骨钙素的 含量，并于培养的第20天观察矿化结节的形成。另外，在大豆异黄酮作用12 的表达。 结果体外培养成骨细胞的生长呈现3个阶段一快速增殖期、细胞外基质成 熟期以及基质矿化期。不同浓度的大豆苷原(10。10～104M】作用于成骨细胞48小 时可以促进成骨细胞的增殖、增加成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。染料木黄酮 (10-您～106M)作用于成骨细胞48小时对成骨细胞的增殖和细胞内碱性磷酸酶的 活性没有明显影响，染料木黄酮作用于成骨细胞96小时后，lO{M剂量组可以 促进成骨细胞的增殖，10。8M和10击M剂量组可以增高细胞内碱性磷酸酶的活性。 (7天、12天)。大豆苷原(104M)、染料木黄酮(1矿M)可以促进成骨细胞矿化结节 的形成。和E2一样，染料木黄酮对成骨细胞功能的影响可以被ICI182780抑制， 而大豆苷原对成骨细胞功能的影响不受ICI 182780抑制。染料木黄酿j(10。8和 表达无明显影响。 复旦大掌硬士掌位论文 中文摘耍 结论 一定剂量的大豆苷原和染料木黄酮都可以促进成骨细胞的增殖和早 期分化、增加成骨细胞骨钙素的分泌和促进矿化结节的形成，他们对成骨细胞作 用的功效比雌二醇弱。和染料木黄酮相比，大豆苷原促进成骨细胞增殖和早期分 化的能力较强，但其增加成骨细胞分泌骨钙素的能力较染料木黄酮弱。两者促进 成骨细胞钙化的能力相仿。和雌二醇类似，染料木黄酮对成骨细胞功能的影响要 通过雌激素受体依赖的途径；而大豆苷原对成骨细胞功能的影响不需要通过雌激 mRNA的表达，这 素受体途径。一定剂量的染料木黄酮可以促进成骨细胞ER-n 可能在一定程度上放大了其对成骨细胞作用的功效。大豆苷原和雌二醇对成骨细 胞ER．d和ER_13mRNA的表达没有明显影响。 关键词大豆异黄酮；大豆苷原；染料木黄酮；成骨细胞；增殖；碱性磷酸 酶：骨钙素；矿化结节；雌激素受体 2 复旦大掌硬士掌位论文 英文摘要 on Effectsofisonavonesratosteoblastsinvitro Abstract isa whichis inthe globalproblem objeetiveOsteoporosis incre