延胡索碱及延胡复方抗冠心病室性心律失常的实验与临床研究.pdf

中文摘要 研究背景 当今，冠心病已成为人类三大死亡原因之一，我国冠心病的发病率正逐年上升． 冠心病的基本病理生理就是心肌缺血，要挽救缺血心肌就必须及时、有效地恢复缺血 心肌的再灌注。但是缺血心肌在恢复血流灌注后，往往引起缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury，IRI)．如何防治心肌缺血再灌注损伤已成为心脏病学基础应用研 究中的一个重要领域。 性因素，很难在临床推广应用，因此寻找安全有效的药物作为药物预处理手段防治IRI 具有重要的现实意义．1988年，美国著名的CAST试验结果表明：抗心律失常药物有 潜在致心律失常作用的危险性。这种危险性给发展中药预处理防治IRI，特别是抗再 灌注心律失常带来了机遇和挑战。 近来在心血管疾病的防治研究中，特别是在治疗缺血性心脏病和抗心律失常方 面，许多复方都选用了延胡索。延胡索是一种活血化瘀中药，现代药理研究表明【4’51， 其具有增加冠脉流量、扩张血管、改善心肌营养性血流量及抗心律失常等作用。但是 应用延胡索碱预处理抗心肌缺血再灌注损伤的实验研究及运用延胡索复方桃仁红花 煎治疗冠心病室性心律失常的临床研究却未见报道。本课题即打算在此领域作些有益 的探索。 实验研究 【目的】 通过动物实验，比较药物预处理与缺血预处理对心肌缺血再灌注损伤的作用效 果，评价延胡索碱预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其药理作用机制。 【方法与内容】 采用SD大鼠，随机分为6组：假手术组、模型组、缺血预处理组、延胡索碱低、 中，高剂量组。建立大鼠心肌缺血再灌注模型，运用膜片钳技术、流式细胞仪技术、 免疫组化、电镜酶细胞化学和分子生物学等方法，从整体、细胞乃至分子基因水平探 讨延胡索碱预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其药理作用机制．实验共 分为六个部分。实验一：观察延胡索碱预处理对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响。 实验--：观察延胡索碱预处理对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。实验三：观察延胡 观察延胡索碱预处理对单个心肌细胞膜上。型钙通道动力学的影响。实验五：观察延 胡索碱预处理对缺血再灌注心肌细胞内游离Ca2+浓度的影响。实验六：观察延胡索碱 预处理对缺血再灌注心肌梗死范围的影响。 【结果】 1．室性心律失常发生率比较：延胡索碱中、高剂量组的室速(VT)和室颤(VF) 的发生率显著降低，与模型组比较差异有统计学意义(Po．05，P0．01)，延胡索碱低 剂量组上述指标变化无统计学意义60．05)；与缺血预处理组比较，延胡索碱中、高 生率的影响，差异无统计学意义(P0．05)。 2．心律失常发生时间比较：延胡索碱低、中、高剂量组的心律失常出现时间明 显推迟、持续时间明显缩短，与模型组比较差异有显著性口o．01)。与缺血预处理组 比较，延胡索碱预处理虽也能推迟心律失常出现时间、缩短心律失常持续时间，但作 用较之减弱(Po．01)。 假手术组sT段抬高程度无明显改变，模型组ST段则明显抬高；与模型组比较，缺血 预处理组和延胡索碱预处理各剂量组ST段抬高幅度虽有所降低，但差异无显著性 (PO．05)．心率变化比较：与模型组比较，延胡索碱低、中、高剂量组，以及缺血 预处理组均能明显减慢心率，差异有显著性(P0．01)；与缺血预处理组比较，延胡索 低、中剂量组减慢心率的作用较之减弱(P0．01)，延胡索碱高剂量组则较之增强 (PO．05)． 4．原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠心肌细胞凋亡结果：假手术组心肌仅偶 见细胞凋亡发生，模型组可见大量胞核呈深浅不一棕褐色的凋亡心肌细胞，心肌细胞 凋亡指数明显高于假手术组(Po．01)；缺血预处理组和延胡索碱高、中、低剂量组凋 亡心肌细胞和心肌细胞凋亡指数均较模型组明显减少(P0．01)；而缺血预处理组和延 胡索碱高剂量组间差异无显著性Ⅱ，0．05)． 5．心肌细胞bcl．2基因蛋白表达变化：与假手术组比较，抑凋亡基因bcl．2在缺 血再灌注后表达明显减少，心肌细胞bel-2蛋白阳性表达指数(PEI)明显低于假手术组 和延胡索碱高剂量组比较，差异无显著性(PO．05)。