氧化应激在氢醌人胚肾细胞HEK293DNA损伤中的作用.pdf

DNA 氧化应激在氢醌致人胚肾细胞HEK293 损伤中的作用 硕士生姓名：施琳琳 指导教师：刘晓芳 副教授 专业名称：劳动卫生与环境卫生学 摘 要 可作为摄影工业的显影剂，橡胶工业的抗氧化剂，食品的抗氧化剂生产 中间体，并作为聚合乙烯和丙烯酸为单体抑制剂。日常生活中通过某些 药物、化妆品也可长时间接触。HQ是苯的代谢物，在苯毒性效应中发挥 着重要作用。HQ主要在肝内代谢，经尿排出而解毒；部分富集于骨髓组 织，进一步代谢生成对苯醌和对苯半醌。人群流行病调查及实验动物研 究均发现长期接触HQ可对肝、肾、骨髓造血造成损伤。 forResearchon 1999年，国际癌症研究机构(International Agency 类致癌性进行分类。体外实验表明，HQ可引起染色体突变。 及可能机制，旨在为评估HQ对人类健康的危害提供有价值的实验室依 据。 方法：试验系统为HEK293细胞系。通过改良的单细胞凝胶电泳 23(Rhl 23)和吖 (SCGE)试验检测细胞DNA损伤情况。通过罗丹明1 啶橙(AO)分别测定细胞内线粒体膜电位和溶酶体膜稳定性；通过2’，7’一 定8．羟基脱氧鸟苷(8．OHdG)在细胞内的表达水平。为探讨其可能的氧 化性机制，采用DL一甲硫氨酸磺酰亚胺(BSO)和抗氧化物质羟基酪醇 效应的影响。 25，6．25，1 结果：HQ(3．1 2．5“M)作用于细胞后，DNA的迁移距 离明显增加，且呈剂量依赖关系；作用于HEK293细胞可引起细胞内溶 酶体膜稳定性的破坏和线粒体膜电位的下降，也可使细胞内ROS表达水 平的明显增加及GSH的耗竭；明显增加HEK293细胞内8．OHdG水平。 HT能够拮抗HQ引起的DNA链断裂的形成：BSO能够加剧HQ引起的 DNA链断裂的损伤。 结论：HQ可致HEK293细胞DNA损伤，其作用机制可能是通过线 粒体膜电位的下降，溶酶体膜破坏，细胞内ROS产生增高及GSH的耗 竭，进而导致氧化性DNA损伤。 关键词：氢醌HEK293细胞系单细胞凝胶电泳DNA损伤氧化性 应激 2 Therole stressin ofoxidative DNA HQ—-induced damage inHEK293 cells Master candidate：LinlinShi degree Liu Supervisor：Professor：Xiaofang andEnvironmentalHealth Major：Occupational Abstract