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藠头皂苷的分离化及其活性研究

缩略语 缩略语 Abbreviations 摘要 摘要 chinense 蓖头(Allium G.Don)俗称“荞头”,是一种传统的药食两用资源, 原产于中国,具有悠久的种植历史,在古代中国的文献中就有记载。蓖头性味 辛,作为一种2000多年历史的传统中药材,具有温中通阳,理气宽胸,还阳散 结之功效。本文主要研究了蓖头皂苷的提取、分离纯化工艺,并对蓖头皂苷的 生理活性进行了探索。 在单因素的基础上,利用响应曲面法优化了藻头皂苷的提取工艺,并比较 了两种不同提取方法对菖头皂苷得率的影响。结果表明,超声辅助提取法具有 较高的皂苷得率,经过优化后最佳提取工艺为:提取时间40min,料液比1:16, 乙醇浓度71%,温度55℃,蓖头总皂苷得率为3.71%。 本文比较了几种不同树脂对菖头皂苷的分离纯化效果,筛选出D101大孔树 脂作为分离蓖头皂苷的树脂,并优化了D101大孔树脂的分离条件,即将菖头皂 苷提取液上D101大孔树脂,吸附2.5h,分别以蒸馏水和5%的乙醇洗脱至流出 液无色,葸酮.硫酸显色无色,然后以5倍树脂体积的70%乙醇进行洗脱,收集 70%的乙醇洗脱液,浓缩后真空干燥,得到较纯的菖头皂苷干燥样品。纯化后莒 头皂苷的纯度为63.06%,表明D101大孔树脂具有较好的分离纯化效果。定性 试验研究表明,蓖头皂苷中皂苷类型主要为甾体皂苷。 实验研究了莒头皂苷的抗氧化活性,结果表明蓖头皂苷的总还原力较强; 对羟自由基清除试验中,蓖头皂苷表现出一定的清除能力,但清除效果较弱; 蓖头皂苷展现出良好的DPPH自由基清除能力,当浓度为2mg/mL时清除率达 到94.8%。蓖头皂苷对超氧阴离子自由基具有一定的清除作用,但效果较不显著, 低于阳性对照Vc。 本文研究了蓖头皂苷体外抑制c【.葡萄糖苷酶活性,通过与阳性对照阿卡波 糖进行比较发现,蓖头皂苷具有较好的抑制活性。蓖头皂苷的抑制活性与浓度 摘要 具有相关性,抑制率最高为50.2%:碱性条件F蓖头皂苷抑制活性较高;经过 作用机制是竞争性与酶结合,与阳性对照阿卡波糖作用机制相同。 实验还进行了蓖头皂苷在体外清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的研究,结 果表明在模拟胃液中菖头皂苷具有较强的清除亚硝酸盐以及阻断亚硝胺合成的 能力。模拟胃液环境下,亚硝酸盐清除率最高达99.2%;亚硝胺合成阻断实验中 最大阻断率达到97.4%。本文还探讨了非模拟胃液条件下蓖头皂苷清除亚硝酸盐 以及阻断亚硝胺合成的能力,结果表明pH对实验结果影响最大,pH为1.3时的 清除率最高,清除率达到98.3%;在pH为1.3的非模拟胃液体系中,蓖头皂苷 对亚硝胺合成阻断能力随着浓度的增大呈现上升的趋势。在实验浓度范围内, 阻断率与浓度呈现显著的量效关系,当浓度从0.25mg/mL上升到4.0meflmL时, 阻断率从66.2%升高到97.0%。蓖头皂苷对亚硝胺合成阻断能力随着反应时间延 长而增加,当反应时间为75min时,随着反应时间的延长,阻断率并没有提高, 反应达到饱和状态。 关键词:蓖头皂苷;抗氧化;抑制0【.葡萄糖苷酶;亚硝酸盐清除;亚硝胺合成 阻断 IV Abstract ABSTRACT Chinese G known chinense is jiaotou(AlliumDon),also as‘rakkyo’which nativetoChinawasoneoftheoldestcultivatedandwasusedsinceancient plants timesbothasfoodandmedicine.Itsusehasbeen documentedsinceancient

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