升阳益胃汤阻断缩性胃炎大鼠细胞 TLR4信号转导通路的研究.pdfVIP

升阳益胃汤阻断萎缩性胃炎大鼠细胞TLR4信号转导通路的研究 升阳益胃汤阻断萎缩性胃炎大鼠细胞TLR4信号转导通路的研究 目录 摘要 1 ABSTRACT…………………………………………………………………………… ………3 英文缩略词表6 前言7 一、理论研究8 1现代医学对CAG 的研究8 1.1 病因8 1.2 慢性萎缩性胃炎的西医诊断11 1.3 慢性萎缩性胃炎的西医治疗15 2 慢性萎缩性胃炎的中医研究进展17 2.1 古籍中有关慢性萎缩性胃炎的论述17 2.2 慢性萎缩性胃炎的病因分析17 2.3 慢性萎缩性胃炎的病机19 2.4 慢性萎缩性胃炎的中医药治疗21 3 升阳益胃汤的研究及临床应用22 4 现代医学对Toll样受体的研究进展23 4.1 TLR4及MYD88 的结构24 4.2 NF- B与其抑制物I- B 的关系24 Κ Κ 4.3 信号转导途径25 4.4 在疾病过程中免疫调节的作用26 二、实验部分28 1实验材料28 1.1实验动物28 1.2实验试剂28 1.3实验设备29 2 实验方法29 2.1 技术路线图30 2.2 用于实验药物的剂量的换算方法31 2.3 实验动物分组及编号方法31 升阳益胃汤阻断萎缩性胃炎大鼠细胞TLR4信号转导通路的研究 2.4 建立大鼠CAG模型 32 2.5 用药及治疗方案 32 2.6 标本的采集及处理 33 2.7 RT-PCR法测TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-κB基因的表达的方法及步骤 33 2.8 Western-blot法测TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-κB蛋白的表达的方法 及步骤 36 2.9 统计分析38 3 实验结果38 3.1 实验观察38 3.2 RT-PCR法测TLR4、M D88、MAPK、NF- B、I- B基因的表达结果40 Y Κ Κ 3.3 Western-blot法测TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-κB蛋白表达结果 41 3.4 结论43 三、讨论45 1 CAG动物模型的建立45 2 慢性萎缩性胃炎与TLR4、MYD88、MAPK、NF-ΚB、I-ΚB 因子的关系46 3 升阳益胃汤对TLR4、M D88、MAPK、NF- B、I- B 因子的阻断作用47 Y Κ Κ 四、结语49 1 结论49 2 存在问题与展望49 参考文献50 致谢54 附录55 附录1：动物实验设施使用证55 附录2：实验动物质量合格证56 附录3：RT-PCR实验相关数据57 附录4：Western-blot实验相关数据…………………………………………… 60 附录5：在校期间发表论文61 升阳益胃汤阻断萎缩性胃炎大鼠细胞TLR4信号转导通路的研究 摘 要 目的：本课题通过升阳益胃汤对大鼠CAG模型进行干预，观察该方阻断萎缩性胃 炎大鼠细胞TLR4信号转导通路的效果，研究其治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制，为 进一步开发有效新药奠定前期基础。 方法：本课题实验采用理化因素制模法建立大鼠CAG模型，取SPF级成年Wister 大鼠90只，体重200±20g，雌雄各50只，给予其正常喂食三天后，随机抽取 10 只， 雌雄各半，作为正常空白对照组,余下 80 只均采用用0.05%氨水、10mmol/L去氧胆 酸钠、30%酒精与2%水杨酸混合液及免疫方法配合饥饱失常建立大鼠CAG模型，连续 10 周。于造模第 7 周随机将 80 只大鼠分为模型组、硫糖铝对照组、升阳益胃汤低