第八章双水相萃取技术详解.ppt

三步双水相萃取酶的流程示意图 （二）PEG循环 在大规模双水相萃取过程中，成相材料的回收和循环使用，不仅可以减少废水处理的费用，还可以节约化学试剂，降低成本。 PEG的回收有两种方法： ①加入盐使目标产物转入富盐相来回收PEG； ②将PEG相通过离子交换树脂，用洗脱剂先洗去PEG，再洗出蛋白质。 （三）无机盐的循环 一种方法使将含磷酸钠的盐相冷却到6℃，使盐结晶析出，然后用离心机分离收集； 另一种方法是用电渗析法、膜分离法回收盐类或除去PEG相的盐。 三、大规模双水相萃取及其简单设备 两步萃取法连续分离胞内酶的流程示意图 第四节 双水相萃取技术在生物、食品工业中的应用 （1）提取酶和蛋白质。 （2）进行萃取性生物转化 (3)酸水解产物中提取二肽、氨基酸、核苷酸等风味物质 （4）萃取细胞、细胞器、膜等粒子 （5）应用于液－液分配层析 第五节 双水相萃取分离技术的发展方向 一、开发廉价的新型双水相体系 体 系 优 点 缺 点 高聚物/高聚物 盐浓度低，活性损失小，可用离子交换层析纯化 成本高，粘度大，分相困难 高聚物/盐 成本低，粘度小， 比较适合工业规模的应用 盐浓度高，非盐水的处理比较困难，活性损失大,界面吸附多 目前比较成功地是用变性淀粉PPT代替昂贵的Dextran。PPT-PEG体系已被用于从发酵液中分离过氧化氢酶、β-半乳糖甘酶等。PPT-PEG体系比PEG-盐体系稳定，和PEG-Dextran体系相图非常相似， 二、双水相分配与相关技术的集成化 思考题 名词解释：聚合物的不相容性；相图。 双水相体系的是怎样形成的？其组成是什么？ 影响双水相萃取分配平衡的因素有哪些？ 双水相萃取技术有什么优越性？ * 第八章 双水相萃取技术 第一节 概　述 1896年，荷兰微生物学家Beijerinck发现聚合物的不相容性:把明胶与琼脂或明胶与可溶性淀粉溶液混合时，得到一种不透明的混合溶液，静置后分为两相，上相含有大部分水，下相含有大部分琼脂（或淀粉），而两相的主要成分都是水. 1955年，瑞典伦德大学的Albertsson首次利用双水相技术从单细胞藻类中分离淀粉核，从此开创了双水相分配技术。 1979年德国GBF的Kula和Kroner等[3]人将双水相体系用于提取酶和蛋白质，使胞内酶的提取过程大为改善。 一、基本概念及分类 双水相系统:某些亲水性高分子聚合物的水溶液超过一定浓度后可形成两个不相混溶的水相。 聚合物-聚合物-水系统:聚合物分子的空间阻碍作用使相互间无法渗透 。 聚合物-无机盐-水系统:盐析作用。 为什么会形成双水相？ 聚合物之间的不相容性:聚合物分子的空间阻碍作用使相互间无法渗透，从而在一定条件下分为两相。 只要两种聚合物水溶液的水溶性有所差异，混合时就可发生相分离，并且水溶性差别越大，相分离倾向也就越大。 某些聚合物的溶液在与某些无机盐等低分子质量化合物的溶液相混时，只要浓度达到一定值，也会产生两相。其形成机理是由于盐析作用。 双水相系统分类 双聚合物体系：聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)/葡聚糖（dextran，Dx）；聚丙二醇（polypropylene glycol）/聚乙二醇；甲基纤维素（methylcellulose）/葡聚糖等。 聚合物和无机盐体系：PEG/磷酸钾（略作KPi）、PEG/磷酸铵、PEG/硫酸钠等 类型 形成上相的聚合物 形成下相的聚合物 非离子型聚合物/非离子型聚合物 聚乙二醇 聚乙烯醇、葡聚糖、聚蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮 聚丙二醇 聚乙二醇、聚乙烯醇、葡聚糖、甲基聚丙二醇、羟丙基葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮 羟丙基葡聚糖 葡聚糖 聚蔗糖 葡聚糖 乙基羟基纤维素 葡聚糖 甲基纤维素 羟丙基葡聚糖、葡聚糖 高分子电解质/非离子型聚合物 羧甲基葡聚糖钠盐 聚乙二醇 高分子电解质/高分子电解质 葡聚糖硫酸钠 羧甲基纤维素钠 羧甲基葡聚糖钠盐 羧甲基纤维素钠 非离子型聚合物/低分子量化合物 葡聚糖 丙醇 非离子型聚合物/无机盐 聚乙二醇 磷酸钾、硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、酒石酸钾钠、甲酸钠 与一般的水-有机溶剂体系相比较有什么不同？ 双水相体系中两相的性质差别（如密度和折射率等）较小。由于折射率的差别甚小，有时甚至都难于发现它们的相界面。两相间的界面张力也很小，仅为10-5~10-4 N/m（一般体系为10-3~2×10-2 N/m）。 三、双水相萃取技术的基本特点 两相的性质差别（如密度和折射率等）较小 两相间的界面张力也很小 （一）条件温和，体系具有生物亲和性 （二）所需溶液少，操作方便 （三）分离迅速，步骤简便 （四）操作易于控制 （五）可简化分离步骤 （六）能进行萃取性的生