内蒙古大兴安岭区人埃立克体病自然疫源地的发现与调查.pdfVIP

翌兰兰竺丝苎———————————j生—里 内蒙古大兴安岭地区人埃立克体病自然 疫源地的发现与调查 (中文摘要) 人粒细胞埃立克体病(Humangranulocytic 单核细胞埃立克体病(Human monocytic 来发现的两种分布较广的经蜱传播的疾病。由于新发现病例数的不断增 加，和报道的疫源地越来越多，这两种病的公共卫生学意义受到许多国 家和地区的关注。～些国家正在加紧研究。据报道，莱姆病的流行区往 往也是人埃立克体病的流行区。为此我们在大兴安岭林区进行了人埃立 克体病的流行病学调查。目的在于证明调查地是否存在埃立克体感染， 并通过这次调查为今后进一步开展系统研究提供方法。另外还调查了莱 姆病螺旋体感染的危险因素，以便为该地区人埃立克体病等蜱传病的防 治提供参考。 7由于病原体是专性细胞内寄生菌，直接培养和纯化较为困难。PCR 检测和序列分析技术灵敏度和特异性较好，且对标本要求不高。因此， 根据这两种埃立克体的16SrRNA基因序列，构建PCR特异引物，对 采自我国大兴安岭等北方地区的蜱、动物脏器和人血标本进行PCR检 测，并对扩增出的产物进行DNA序列分析，与GenBank注册的序列进 行比较。 首先本研究采用半巢式PCR从内蒙古大兴安岭采集的全沟硬蜱和 森林革蜱，新疆精河采集的全沟硬蜱和草原革蜱中扩增出390 bp的 HME病原体“查菲埃立克体(Ehrlichia rRNA基因片段：同时检测的大兴安岭的嗜群血蜱和北京灵山采集的长 角血蜱未扩增出相应的片段。大兴安岭莫尔道嘎林业局采集的全沟硬蜱 两种蜱的带菌率有显著差异(矿=15．53，P0．01)；而雌性全沟硬蜱的 竺兰：竺竺!坚—————二旦——墅 和雄性森林革蜱的阳性率14．28％(5／35)的差别也不显著(Z2=0．43， P0．05)。大兴安岭乌尔旗汗林业局采集的全沟硬蜱携带Ec的最小阳性 率为4．28％(9组／210；最小阳性率=阳性组数／蜱总数，是假定由数只蜱制 成的一个PCR模板检测阳性时，只认为这个模板中仅有1只蜱是阳性的； 本实验中，1组蜱制成的一个PCR模板均由5只蜱制成)。新疆精河采集 的全沟硬蜱和草原革蜱携带EC最小阳性率分别是5．79％(11组／190只) 和1．67％(1组／60只)。另外，还从大兴安岭森林中捕捉到的8只野 16S 合物)中检测到EC rRNA基因片段。 对莫尔道嘎采集的蜱标本进行近1500 rRNA全基因的 bp的ECl6S 扩增与分析，结果扩增出的序列与美国一株EC(GenBank U23503)的 相应序列完全相同。 而后同样应用半巢式PCR和序列分析技术，也从蜱标本中扩增出 ehrlichia)16S 人粒细胞埃立克体(Human rRNA基因片段。 granulocytic 从莫尔道嘎林业局采集的全沟硬蜱和森林革蜱人粒细胞埃立克体的阳 从乌尔旗汗林业局采集的全沟硬蜱和嗜群血蜱的阳性率分别为3．81％(最 小阳性率，8组／210)和2％(1／50)；新疆精河采集的全沟硬蜱和草原革 蜱最小阳性率分别为3．16％(6组门90)和1．67％(1组／60)。 对莫尔道嘎采集的一只全沟硬蜱标本进行近1500 bp的人粒细胞埃 立克体16SrRNA全基因分析，结果与美国一株人粒细胞埃立克体 (GenBank U02125)的相应序列完全相同。 另外还从内蒙古大兴安岭采集的人血标本中扩增出特异的EC和人 粒细胞埃立克体16SrRNA基因片段。这是首次在亚洲，从人血中扩增 出人埃立