细胞型朊蛋白在同月龄小鼠视网膜中表达的实验研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 月龄正常ICR小鼠视网膜中的基因表达情况和蛋白表达情况，分析小鼠视网膜 中PrP。的表达与月龄的关系。并观察分析18月龄小鼠视网膜组织与大脑组织 PrPc的表达含量的差异。为后续开展PrP。与阿尔茨海默病(AD)和视觉病变间的 关系提供实验依据。 方法： 选取2周龄，9月龄，18月龄健康ICR小鼠，每月龄段20只，雌雄各半。 充分暴露眼球于眼缘，离断眼球后极部的视神经，利用显微器械轻柔迅速的取 出视网膜，将视网膜放入EP管内，于．800冻存。分别使用逆转录聚合酶链式反 Chain 应(ReverseTranscriptionPolymerase 膜组织中PrP。基因的表达情况；蛋白质印迹法(Western Blot，WB)技术检测各组 小鼠视网膜组织中PrP。蛋白的表达情况。上述两种方法分别检测13-actin表达作 为内参因子。分析小鼠视网膜中PrP。的表达水平与月龄的关系及18月龄小鼠视 网膜与大脑组织PrPc的表达含量的差异。 结果： 1、各月龄段小鼠样本组织中内参因子13-actin的表达较稳定，不随月龄变化 而改变，证实本研究所用PCR及WesternBlot技术稳定可靠，无明显操作误差； 2、2周龄、9月龄、18月龄小鼠视网膜中PrP。基因表达水平随月龄增大而 逐渐增强，各月龄段PrP。表达水平比较均有显著性差异(P0．01)；各月龄段小 鼠视网膜中PrP。蛋白表达水平亦随月龄增大而增强，各组比较均有显著性差异 (PO．01)： 3、18月龄组小鼠脑组织中PrP。表达水平高于同组视网膜的表达水平，其差 异有统计学意义(尸O．01)。 结论： 在正常小鼠视网膜中存在PrP。蛋白基因的表达，且表达水平随着小鼠月龄的 增加而逐渐增强，但弱于脑组织中的PrP。的表达强度。 关键词：细胞型朊蛋白；视网膜；ICRd、鼠，p．淀粉样蛋白 Abstract ABSTRACT Objectives： ofthenormal theobservation protein，PrPc) Through prionprotein(cellularprion 9 8monthsof intheretinaofICR at2weeksof ofmonths，1 gestation age，theage ofthe betweenthe mice and relationship expression geneexpressionprotein，analysis and of mouseretinawithmonths．Observationdifferentially ofPrPoin analysis tissueofPrP。mice18monthsof inretinaltissueandbrain age．Itprovide expressed of visual basisforthe PrP。，Alzheimer’Sdisease(AD)