脱氧雪腐镰刀菌醇影响人正常食管上皮细胞抗原提呈相关分子表达的时间效应.pdfVIP

ⅢIii r iii IrlI r i Illl IrI ＼1901240 目 录 中文摘要……………………………………………………………………l 英文摘要……………………………………………………………………6 英文缩写……………………………………………………………………12 研究论文脱氧雪腐镰刀菌烯醇影响人正常食管上皮细胞抗原提呈相 关分子表达的时间效应 前言……………………………………………………………………13刖舌……………………………………………………………………13 材料与方法……………………………………………………………14 结果……………………………………………………………………23 附图…………………………………………．．………………………．26 附表……………………………………………………………………37 讨论……………………………………………………………………4l 结论……………………………………………………………………43 参考文献………………………………………………………………44 综述 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对机体免疫功能的影响…………………47 致谢…………………………………………………………………………58 个人简历……………………………………………………………………59 中文摘要 脱氧雪腐镰刀菌烯醇影响人正常食管上皮细胞抗原提呈相关分子表 达的时间效应 摘 要 目的：中国是食管癌的高发区，今年来，食管癌的发病率在逐年上升。 为了研究食管癌的发生机制，本实验室对食管癌高发区居民饮食中的毒素 污染情况进行了长达10年的监测，系统地探讨了黄曲霉毒素、杂色曲霉 素和脱氧雪腐镰刀菌烯醇在食管癌发生发展中的作用，首次发现了这三种 毒素都可以影响免疫细胞的功能，降低抗原加工提呈相关分子的表达，其 中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的作用更为明显。 VT)，在我国一些消化道肿瘤，比如胃癌和食管癌的高发区域，DON的 污染极为突出，DON的检出率和检出量位于各真菌毒素污染之首。有研 究表明，DON可以明显影响人和动物的免疫功能。有研究进一步发现， DON的倍半萜烯结构是其抑制免疫功能的本源，它可以抑制转录、翻译 和蛋白合成等过程，同时，DON也可以通过干扰机体内正常的免疫调节 而增强免疫功能。因此，DON对免疫功能有正反两方面的影响，既可以 抑制机体的免疫应答，又可以诱发自身免疫反应。有研究发现，DON可 以抑制免疫细胞增殖并且诱导其凋亡，同时可以激活巨噬细胞、T细胞产 生炎症前细胞因子，辅助性T细胞产生细胞因子。HLA．I类分子和抗原加 工转运相关分子的正常表达是保证机体正常免疫功能的前提。对于DON 作用于人正常食管鳞状上皮后免疫相关分子的表达情况，国内外均鲜有报 、jL厶 遭。 本研究运用细胞培养，免疫细胞化学，Western 变化情况，分析了DON处理不同时间影响抗原提呈相关分子表达的时间 效应关系，进一步揭示DON暴露对人免疫功能可能的负面影响以及在我 国食管癌高发区肿瘤发生发展中的可能作用。 中文摘要 方法： 1人正常食管上皮细胞原代培养 在无菌条件下，将食管粘膜组织用含有青霉素200U／ml、链霉素 200p∥“的PBS溶液反复冲洗至无血迹为止，剪除粘膜下层多余的血管 (O．1．1．O)×106个／cm2接种于25cm2培养瓶，放入37。C 5％C02的培养箱 培养。待细胞贴壁后首次换液，以后每2．3天换液一次。 2人正常食管上皮细胞的鉴定 倒置显微镜下观察细胞细胞形态和生长情况，细胞爬片后用广谱CK 进行免疫细胞化学染色，鉴定细胞来源。 3实验分组与处理 当人正常食管上皮细胞生长铺满瓶