2012高考生物世纪金榜二轮复习精品课件专题八 生物技术实践2.pptVIP

1.PCR 技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了乙肝病毒，你认为可以用 PCR 扩增血液中的（ ） A.白细胞 DNA B.病毒蛋白质 C.血浆抗体 D.病毒 DNA 【解析】选D。PCR技术是DNA多聚酶链式反应技术，乙肝病毒是DNA 病毒，可扩增病毒的 DNA，以此检测分析病人是否感染了病毒。 2.样品DNA经PCR技术（多聚酶链式反应）扩增，可以克隆出大量DNA分子。其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如图）。在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活动的生物体。 * 一、酶在食品制造和洗涤等方面的应用 1.纤维素酶与果胶酶 2.加酶洗衣粉 （1）概念：指含酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶四类。 （2）洗涤原理 二、植物的组织培养 1.影响植物组织培养的因素 （1）内因：材料的种类、年龄、保存时间长短等 2.植物组织培养与花药培养技术的比较 三、DNA和蛋白质技术 1.DNA的粗提取和鉴定方法 （1）材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织。 （2）破碎细胞的方法 ①动物的红细胞：吸水破裂。 ②植物细胞：加入洗涤剂、食盐后研磨。 （3）除去杂质的方法 方法一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过调节NaCl溶液的浓度除去溶于和不溶于NaCl溶液中的杂质。 方法二：利用DNA对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10 min～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而不会破坏DNA。 方法三：利用DNA对高温的耐受性，将滤液放在60 ℃～ 75 ℃的恒温水浴箱中保温10 min～15 min，使蛋白质变性沉淀而DNA分子还未变性。 （4）DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的95%的酒精溶液，静置2 min～3 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物。 （5）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 2.DNA复制和PCR扩增的区别 3.血红蛋白的提取和分离 （1）凝胶色谱法的原理 影响DNA提取的因素 ①对生物材料研磨不充分或加入蒸馏水量不够，导致核物质没有充分释放出来。 ②在破碎细胞或溶解DNA时搅拌过猛，使DNA分子断裂，不易提取。 ③实验中最好使用塑料器皿，因为DNA易吸附在玻璃器皿上，容易造成损失。 巧用PCR原理分析其反应过程 【典例】（2011·江苏高考）请回答基因工程方面的有关问题： (1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。 ①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为______________。 ②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。 (2)设计引物是PCR技术的关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。 ①第1组：_________________________________________； ②第2组：_________________________________________。 (3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为________________。 (4)用限制酶EcoRV、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如图(1 kb 即1 000个碱基对)，请画出质粒上EcoRV、MboⅠ的切割位点。 【标准解答】解答本题首先要明确两点：①PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都包括变性、复性、延伸三步。②两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。然后结合问题作答。 （1）①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16。②在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。 （2）某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理，原因①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效。②引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效。 (3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。 （4）由图可知，单独用限制酶EcoRV切割质粒，形成一个片段，说明在质粒上只有一个EcoRV切割位点；当用限制酶MboⅠ单独切割质粒时，形成两个片段，说明在质粒上有两个MboⅠ切割位点；当两者联合切割同一质粒时，形成三个片段，说明两种限制酶的切割位点不同，且EcoRV