N-乙酰半胱氨酸对BDE-209致新生鼠海马神经元氧化损伤的影响及其初步探讨BDE-209对海马神经元DNA甲基化水平的影响.pdf

广州医学院硕士论文 NAC 对BDE-209 致神经元氧化损伤的影响及探讨BDE-209 对甲基化水平影响 N- 乙酰半胱氨酸对BDE-209致新生鼠海马神经元氧化损伤的影响及 初步探讨BDE-209对海马神经元DNA 甲基化水平的影响 中文摘要 多溴联苯醚 （Plybrominated diphenyl ethers,PBDEs ）是一些类含溴原子的芳香族 化学物，从20 世纪80 年代起，人们发现阻燃剂多氯联苯（P ， PCBs ）对人体健康有害，而PBDEs 的化学结构与PCB 相似，具有相似的阻燃作用， 故作为多氯联苯 （PCBs ）的替代品，被广泛地应用在各种消费品种中。但 PBDEs 与 PCBs 一样是一种持续的环境有机污染物。随着工业的发展，PBDEs 在世界范围的需 求不断增加，环境中的 PBDEs 的浓度也逐年增多，已高于PCBs 在环境中的浓度。 PBDEs 可沉积在水体和土壤中，并通过食物链，进入动物和人体。在人体的乳汁、脂 肪、血液、肝脏等器官中均可检测出 PBDEs。PBDEs 的急性毒性很低，口服的半数 致死量为5g/kg。而慢性暴露在PBDEs 时，其作用的靶器官为肝脏、肾脏、甲状腺、 神经系统等。目前国内外对低溴联苯醚的相关毒性研究较多，而且较肯定。从大量动 物实验中发现 PBDEs 可能具有肝毒性、生殖毒性、甲状腺毒性、神经发育毒性及潜 在的致癌性等。因此，在欧盟及美国已禁止使用，十溴联苯醚( BDE,BDE-209 或DeBDE) 的毒性较低溴联苯醚类低，在美国及欧洲仍允许生产使用。 而我国不但是 PBDEs 的生产、使用和出口大国，其中十溴联苯醚（BDE-209 ）的生 产使用量最大，而且还是接收电子垃圾的大国。BDE-209 已成为我国重要的环境污染 物。因此，我们深入对十溴联苯醚（BDE-209）的研究有一定的迫切性和必要性。 BDE-209 是使用最广泛的PBDEs，其毒性较低溴类低，但其可以在进入环境后， 经光解、高温分解、生物及微生物降解等过程，转化成溴二苯并二噁英、多溴二苯并 呋喃及低溴代的联苯醚，引起更强的毒性作用。因此，对于BDE-209 对机体是否存 在有危害仍存在有很多争议，然而国内外展开了相关的实验。在动物研究发现， BDE-209 能增加肝细胞癌的发生，使甲状腺激素分泌增加。BDE-209 有胎毒性，在孕 期接触BDE-209，能雄性子鼠的生殖功能受损。而神经发育毒性是近年人们最关注部 分。这是因为在动物实验中发现，在孕期及产后暴露在多种 PBDEs （包括 BDE-47,153,209 等）后，均会产生持久性的行为改变，特别在肌肉活动及认知、学习、 1 广州医学院硕士论文 NAC 对BDE-209 致神经元氧化损伤的影响及探讨BDE-209 对甲基化水平影响 记忆能力方面；而且近年发现乳汁中PBDEs 的含量不断增加，母乳喂养的婴儿体内 含有PBDEs 的水平比非母乳喂养的婴儿高，而且婴幼儿体内PBDEs 的浓度比成年人 要高，这除了与母乳喂养有关之外，与接触房屋中的垃圾及婴幼儿排泄 PBDEs 的能 力较低有关系。可见，对BDE-209的深入研究，对人类的环境健康及优生优育都具有 重要的意义。 我们的研究小组在前期实验中，对原代胎鼠海马神经元细胞进行 BDE-209 染毒 后，发现在一定剂量的BDE-209作用下，原代胎鼠海马神经元细胞可发生凋亡及氧化 损伤，并存在一定得剂量-反应关系，推测氧化应激可能是BDE-209 引起神经毒性的 重要机制之一。但目前 BDE-209 是如何导致学习记忆能力下降的机制仍不清楚，有 否基因毒性仍不明确。 本课题主要在细胞水平上研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对BDE-209 致原 代培养海马神经细胞氧化损伤的影响以及初步研究 BDE-209 对原代培养海马神经元 细胞整体 DNA 水平甲基化的影响。DNA甲基化是一种基因表达调控的重要机制，在 很多毒物毒性及疾病中起重要作用；正常DNA甲基化对于中枢神经功能具有重要意义， 异常DNA甲基化状态与肿瘤、智力发育迟缓、免疫缺陷等疾病有一定的相关；对DNA