乙型肝炎病毒dax蛋白突变预测乙肝相关性肝细胞肝癌患者术后生存率的研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写………………………………………………………………………8 研究论文 乙型肝炎病毒DNA X蛋白突变预测乙肝相关性肝细胞肝癌患 者术后生存率的研究 前言………………………………………………………………………9日U舌……………………………………………………………………… 材料与方法……………………………………………………………11 结果……………………………………………………………………17 附图……………………………………………………………………19 附表……………………………………………………………………24 讨1仑……………………………………………………………………29 结论……………………………………………………………………32 参考文献………………………………………………………………32 综述 乙型肝炎病毒DNA X蛋白突变与乙肝相关性肝细胞肝癌关系的研 究进展………………………………………………………………37 致谢…………………………………………………………………………．47 个人简历……………………………………………………………………48 万方数据 中文摘要 乙型肝炎病毒DNAX蛋白突变预测乙肝相关性肝细胞肝癌患者 术后生存率的研究 摘 要 目的：构成乙型肝炎病毒基因组的4个读码框是重叠开放的，各自编 码一种蛋白。其中X基因重叠包绕启动子与增强子2，前核心区和核心区 域的转录作用受以上两个因子控制。由于乙型肝炎病毒聚合酶的校对缺 陷，导致乙型肝炎病毒DNA容易发生突变。HBV基因型和病毒DNA载 量均和乙肝相关性肝细胞肝癌的发病相关联，除此之外，前S1、前S2、 BCP和增强子2区域的基因突变也参与到乙肝相关性肝细胞肝癌的风险 的病例对照研究中。有研究表明这上述区域中的几种基因突变与肝细胞癌 的发展存在相关性。然而，目前只有少数针对乙肝相关性肝细胞肝癌患者 中上述基因突变的预后价值的研究，尤其针对HBX基因区域。通过测定 肝组织样本中乙型病毒性肝炎DNA，Yeh等人发现核心启动子组分 的研究中我们通过利用来自乙肝相关性肝细胞肝癌患者肝癌组织样本中 的乙肝病毒DNA测定出乙型肝炎病毒X的基因序列，并用该序列来鉴定 识别与术后生存相关的基因突变序列。 方法： 1研究对象及随访：选取2007．2009两年间在河北医科大学第四医院 肝胆外科行肝癌切除术的患者，通过影像学检查、组织病理明确诊断为肝 细胞肝癌。采集肝细胞癌患者术中切除的肝癌组织标本，并准确记录所有 患者的性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、Child分级等临床特征。通过 门诊复查、电话等方式随访肝癌患者术后的生存情况，随访时间截止到 2014年12月。 2基因组DNA提取、扩增及测序：用DNA纯化试剂盒提取肝癌组 织标本的基因组DNA，鉴定合格后，采用PCR技术扩增目的片段，设计 两对引物对目的片段进行扩增，引物分别为： HBVIF：5-ATGCGTGGAACCTTTGTG．3’， HBVlR：5-TCGGTCGTTGACATTGCT-3’： HBV2F：5’一CACCTCTGCACGTAGCAr-3t， 万方数据 中文摘要 HBV2R：5’-TCCCAIACAGAGCAGAG．3’。 扩增所得DNA产物通过琼脂糖凝胶电泳检测证实后送测序，每个标本选 用双向重复测序。 线，曲线之间的比较所用的方法是对数秩检验。多因素分析采用Cox风 认为有统计学意义。 结果： 1乙肝相关性